[صفحه اصلی ]   [Archive] [ English ]  
:: صفحه اصلي :: درباره نشريه :: آخرين شماره :: تمام شماره‌ها :: جستجو :: ثبت نام :: ارسال مقاله :: تماس با ما ::
:: دوره 5، شماره 2 - ( 10-1395 ) ::
جلد 5 شماره 2 صفحات 67-75 برگشت به فهرست نسخه ها
همسانه‌سازی و انتقال آنزیم T7RNAپلیمراز باکتریوفاژ T7 به توتون
کبری نعلبندی، اصغر میرزایی اصل ، لیلا خدایی، غلام خداکرمیان
دانشگاه بوعلی سینا همدان دانشکده کشاورزی، گروه بیوتکنولوژی
چکیده:   (348 مشاهده)

کشاورزی مولکولی به تولید پروتئین­های دارویی و آنزیم­های صنعتی توسط گیاهان از طریق مهندسی ژنتیک اطلاق می­شود. آنزیم T7RNA پلیمراز یکی از مهمترین آنزیم­هاست که به طور وسیعی در زمینه­های مختلف بیوتکنولوژی و زیست­شناسی سلولی و مولکولی، از قبیل سنتز و مطالعه ساختار و عملکرد RNA ها در شرایط آزمایشگاهی استفاده می­ شود. RNAهای سنتز شده در شرایط آزمایشگاهی در هیبریداسیون، ریزآرایه، آزمایشات   RNAiو  RNAآنتی­ سنس کاربرد دارد. این آنزیم همچنین در سیستم­های بیانی وابسته به پیشبر و خاتمه دهنده T7 کاربرد فراوان دارد. آنزیم T7RNA پلیمراز یک آنزیم باکتریوفاژی بوده و فعالیت اصلی آن در سیتوپلاسم می­باشد. تحقیق حاضر جهت همسانه­ سازی، انتقال ژن آنزیم T7RNA پلیمراز به هسته­ سلولهای یوکاریوتی و تولید آن در گیاه توتون انجام گرفت. آغازگرهای مناسب از روی توالی ژن T7RNA پلیمراز به همراه توالی­های مناسب برای آنزیم­های برشی، طراحی و ژن T7RNA پلیمراز مورد نظر پس از جداسازی در ناقل بیانیpCAMBIA1304 همسانه­سازی شد. به منظور اطمینان از همسانه­سازی، سازه تهیه شده با استفاده از PCR، هضم آنزیمی و توالی­یابی بررسی شده و همردیفی آن در بانک اطلاعاتی اسیدهای نوکلئیک تأیید گردید. سپس، سازه نوترکیب به کمک سویه LB4404 آگروباکتریوم به گیاهان توتون منتقل و گیاهان تراریخته بر روی محیط­های کشت انتخابی حاوی آنتی­ بیوتیک­های هیگرومایسین و سفوتاکسیم، باززا شدند. حضور و بیان ژن T7RNA پلیمراز در گیاهان تراریخته با روشهای PCR وRT- PCR  تأیید شد.

واژه‌های کلیدی: آنزیم T7RNA پلیمراز، همسانه سازی، انتقال ژن، توتون، کشاورزی مولکولی
متن کامل [PDF 269 kb]   (191 دریافت)    
نوع مطالعه: پژوهشي | موضوع مقاله: مهندسی ژنتیک گیاهی
دریافت: ۱۳۹۵/۸/۲۱ | پذیرش: ۱۳۹۵/۹/۲۴ | انتشار: ۱۳۹۶/۱/۲۰
ارسال پیام به نویسنده مسئول

ارسال نظر درباره این مقاله
نام کاربری یا پست الکترونیک شما:

کد امنیتی را در کادر بنویسید >



XML   English Abstract   Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

Nalbandi K, Mirzaie Asl A, Khodaei L, Khodakaramian G. Cloning and Transformation of Bacteriophage T7 RNA Polymerase in Tobacco. Genetic Engineering and Biosafety Journal. 2017; 5 (2) :67-75
URL: http://gebsj.ir/article-1-147-fa.html
نعلبندی کبری، میرزایی اصل اصغر، خدایی لیلا، خداکرمیان غلام. همسانه‌سازی و انتقال آنزیم T7RNAپلیمراز باکتریوفاژ T7 به توتون. مهندسی ژنتیک و ایمنی زیستی. 1395; 5 (2) :67-75

URL: http://gebsj.ir/article-1-147-fa.html

دوره 5، شماره 2 - ( 10-1395 ) برگشت به فهرست نسخه ها
دوفصل نامه علمی-پژوهشی مهندسی ژنتیک و ایمنی زیستی Genetic Engineering and Biosafety Journal
Persian site map - English site map - Created in 0.054 seconds with 793 queries by yektaweb 3465