|
مقایسه بیان ژن نوکلئوکپسید ویروس پژمردگی لکه ای گوجه فرنگی در دو سویه باکتری E. coli
|
زهرا زائر   ، داود کولیوند* ، امید عینی |
| گروه گیاهپزشکی ، دانشکده کشاورزی، دانشگاه زنجان، ایران ، Koolivand@znu.ac.ir |
|
|
چکیده: (5497 مشاهده) |
از آنجایی که روشهای تولید آنتی بادی برای کاربرد در ویروسها دارای محدودیتهایی میباشد، بیان پروتئین پوششی در سیستم پروکاریوتی به منظور تولید آنتیژن انجام میشود. در پژوهش حاضر ژن نوکلئوکپسید ویروس پژمردگی لکهای گوجه فرنگی از یک جدایه بومی در ایران تکثیر شده و پس از همسانهسازی، قطعه مربوط به ژن نوکلئوکپسید در سازه pTG19TSWV-N با آنزیمهای BamHI و XhoI خارج شد و در حامل بیانی pET32a(+) برش یافته با آنزیمهای BamHI وXhoI همسانهسازی شد. سپس، سازه pET32TSWV-N به سویههای BL21(DE3) و BL21(DE3) pLysS از باکتری E. coli انتقال یافت. بیان ژن نوکلئوکپسید با استفاده از القای پیشبر با غلظت یک میلیمولار IPTG در هر دو سویه صورت گرفت. چهار ساعت پس از القا، محیطهای کشت باکتریایی جمعآوری شدند و محتوای پروتئینی استخراج شده از دو سویه مذکور در الکتروفورز عمودی بررسی شدند. با توجه به وزن مولکولی پروتئین بیان شده به همراه برچسبهایی که از پلاسمید به پروتئین اضافه شده بود، پروتئینی به اندازه حدود 48 کیلودالتون در الکتروفورز عمودی مشاهده شد. نتایج این تحقیق حاکی از بیان ژن نوکلئوکپسید در دو سویه مذکور بود در حالیکه بیان پروتئین در سویه باکتریایی BL21(DE3) pLysS نسبت به BL21(DE3) بیشتر بود.
|
|
| واژه‌های کلیدی: بیان، سیستم پروکاریوتی، پروتئین نوترکیب، ویروس پژمردگی لکهای گوجه‌فرنگی |
|
|
متن کامل [PDF 923 kb]
(1669 دریافت)
|
نوع مطالعه: پژوهشي |
موضوع مقاله:
مهندسی ژنتیک میکروارگانیسم ها و ویروسها
دریافت: 1397/7/7 | پذیرش: 1397/8/12 | انتشار: 1397/8/12
|
|
|
|
|
|
