گروه بیوتکنولوژی دانشکده کشاورزی، دانشگاه شهید مدنی آذریایجان، تبریز، ایران ، pazhouhandeh@gmail.com
چکیده: (2656 مشاهده)
دیرگلدهی در کاهو باعث تولید برگهای زیاد و حفظ کیفیت خوراکی محصول آن میباشد. شروع زمان گلدهی در گیاهان پدیده ای است کاملا هدایت شده که به پارامترهای محیطی و درونی گیاه وابسته است و توسط شبکه تنظیمی ژنهای زیادی کنترل میشود. یکی از مشکلات در زمینه پرورش و عملکرد بالای محصولات زراعی و باغی عدم تطابق زمان گلدهی با شرایط مطلوب است. با افزایش جمعیت، تولید گیاهان کارا و با بیوماس بالاتر ضروری میباشد. در شبکه تنظیمی گلدهی، Flowering Locus C (FLC)، یک فاکتور رونویسی، جعبه MADS است که مانع از گلدهی میشود. مسیر خودمختار شروع گلدهی را به طور مستقل از طول روز، از طریق سرکوبی FLC، تسریع میکند. ژن MSI4/FVE یک ژن کلیدی مسیر خودمختار است که در کنترل زمان تکثیر و تمایز آغازین سلول، رشد اندام و زمان گلدهی درگیر است و نقش کلیدی در تعیین زمان گلدهی دارد و توسط تغییرات اپیژنتیکی موجب کاهش بیان ژن FLC میگردد. هدف این تحقیق استفاده از تکنیک RNA Silencing برای مهار کردن ژن MSI4 در سطح بعد از رونویسی در گیاه کاهو میباشد. برای بهینه کردن کشت بافت گیاه کاهو در محیط کشت MS از هورمونهای BAP، کاینتین و NAA و جهت باززایی مستقیم از ریزنمونههای کوتیلدون و برگ در مدت سه هفته استفاده شد و تیمار هورمونی 1/0 میلیگرم در لیتر NAA و 01/0 میلیگرم در لیتر BAP بیشترین باززایی را نشان داد. برای سنتز ساختار سنجاقسری مورد نیاز در تکنیک RNA silencing، قطعه ای از انتهای ژن MSI4 آرابیدوپسیس توسط PCR تکثیر و با دو همسانه سازی متوالی در دو جهت سنس و آنتیسنس درون وکتور خاموشی pFGC5941 قرار داده شد. آنگاه ساختار سنجاقسری در این وکتور نوترکیب به واسطه آگروباکتریوم به گیاه کاهو انتقال یافت. گیاهان تراریخته بدست آمده به منظور تائید حضور ژن انتقالی در آنها توسطPCR بررسی شد و مطالعه روی فنوتیپ گلدهی این گیاهان تراریخت نشان داد که خاموشی MSI4 در کاهو باعث دیرگلدهی این گیاه (حدود یک و نیم ماه تاخیر) و تولید بیشتر برگ در آن میشود.
Manzari-Fallah M, Pazhouhandeh M, Bordbar M. Delayed flowering in lettuce using MSI4 gene silencing by RNAi. Genetic Engineering and Biosafety Journal 2020; 9 (2) :136-148 URL: http://gebsj.ir/article-1-353-fa.html
منظری فلاح محمد، پژوهنده مقصود، بردبار منا. ایجاد دیرگلدهی در کاهو با استفاده از خاموشی ژن MSI4 به کمک RNA Silencing. مهندسی ژنتیک و ایمنی زیستی. 1399; 9 (2) :136-148