:: دوره 3، شماره 2 - ( 7-1393 ) ::
جلد 3 شماره 2 صفحات 86-76 برگشت به فهرست نسخه ها
بررسی اثر سازگاری سویه در بیان موقت مبتنی بر روش اگروباکتریوم در ارقام خربزه (Cucumis melo L.)
صهبا طوسی ، فرهاد شکوهی فر* ، سعید ملک زاده شفارودی ، عبدالرضا باقری
دانشگاه فردوسی مشهد ، Shokouhifar@um.ac.ir
چکیده:   (4872 مشاهده)

بیان موقت یک ژن اثرگذار در بیماری­زایی (effector) در گیاه میزبان با استفاده از اگرواینجکشن، یک روش قابل قبول برای بررسی نقش ژن در بیماری­زایی است. در این مطالعه تاثیر دو سویه اگروباکتریوم بر چهار رقم استاندارد و دو  رقم محلی خربزه در بررسی بیان موقت مورد ارزیابی قرار گرفت. سازگاری سویه­ های LBA4404  و GV3101  به وسیله تزریق سلولهای باکتری به برگ ارقام خربزه تعیین شد. زنده­مانی سلول­های اگروباکتریوم تزریق شده در بافت برگ به وسیله ارزیابی بیان پروکاریوتی ژن GUS 24 ساعت پس از تزریق تعیین شد. سویه LBA4404   پس از انتقال ناقل pCAMBIA3301  دارای ژن GUS اینترون­دار به عنوان کنترل مثبت برای تایید بیان موقت این ژن در سلول­های گیاه استفاده شد. انتقال ناقل­های pBI121  و pCAMBIA3301  به سویه LBA4404   با روش کلنی PCR با آغازگر­های PSh3-F/R تایید شد. راندمان بیان موقت در برگ­های ارقام خربزه، 48 ساعت پس از اگرواینجکشن سویه  LBA4404  حامل ناقل pCAMBIA3301   به وسیله سنجش هیستوشیمیایی ژن GUS  مشخص شد. برگ­های تزریق شده با سویه LBA4404  دارای ناقل pBI121   فعالیت ژن GUS را نشان دادند که تایید کننده زنده بودن سلول­های اگروباکتریوم در برگ ارقام خربزه بود. تمام ارقام ژن GUS را به صورت موقت با استفاده از اگرواینجکشن پس از گذشت 24 ساعت بیان کردند. این نتایج می تواند در مطالعات آینده به منظور بررسی عملکرد ژن­های اثرگذار منتخب در برهمکنش با ارقام استاندارد خربزه مورد استفاده قرار گیرد.

واژه‌های کلیدی: ارقام استاندارد خربزه اگروباکتریوم بیان موقت سنجش GUS
متن کامل [PDF 993 kb]   (1676 دریافت)    
نوع مطالعه: پژوهشي | موضوع مقاله: مهندسی ژنتیک جانوری
دریافت: 1393/7/23 | پذیرش: 1394/10/29 | انتشار: 1395/11/28


XML   English Abstract   Print



بازنشر اطلاعات
Creative Commons License این مقاله تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است.
دوره 3، شماره 2 - ( 7-1393 ) برگشت به فهرست نسخه ها