fa بهینه سازی کشت بافت و انتقال ژن GUS به موسیر با استفاده از آگروباکتریوم مهندسی ژنتیک جانوری Animal پژوهشي Research <p dir="RTL"><strong>موسیر (</strong><strong><em><span dir="LTR">Allium stipitatum</span></em></strong><strong>) یک سبزی خوراکی بوده و از خصوصیات دارویی بسیار مهمی برخوردار است. بنابراین بهینه&shy;سازی یک سیستم باززایی و تراریزش کارآمد در این گیاه جهت بهبود و اصلاح آن از طریق مهندسی ژنتیک ضروری است. دراین مطالعه، ریزنمونه&shy;های جنین، </strong><strong>طبق</strong><strong> پیاز و ریشه درون شیشه&shy;ای موسیر درمحیط کشت </strong><strong><span dir="LTR">MS</span></strong><strong> حاوی غلظت&shy;های مختلفی از تنظیم کننده&shy;های رشد </strong><strong><span dir="LTR">NAA</span></strong><strong>، </strong><strong><span dir="LTR">2,4-D</span></strong><strong> و </strong><strong><span dir="LTR">BA</span></strong><strong> به&shy;منظور القاء کالوس و باززایی کشت شدند. ریزنمونه&shy;ها با سویه </strong><strong><span dir="LTR">&nbsp;LBA4404</span></strong><strong>باکتری </strong><strong><em><span dir="LTR">Agrobacterium tumefaciens</span></em></strong><strong> دارای</strong> <strong>ناقل </strong><strong><span dir="LTR">pBI121</span></strong><strong> حاوی ژن گزارشگر </strong><strong><em><span dir="LTR">gus</span></em></strong><strong> تراریزش شدند. نتایج نشان داد که ریزنمونه طبق پیاز نسبت به جنین و ریشه کالوس&shy;زایی و باززایی بالاتری داشت و بیشترین باززایی (100 درصد) در ریزنمونه طبق پیاز و در محیط کشت </strong><strong><span dir="LTR">MS</span></strong><strong> حاوی پنج میلی&shy;گرم در لیتر</strong><strong><span dir="LTR">BA</span></strong><strong> به همراه یک میلی&shy;گرم در لیتر </strong><strong><span dir="LTR">NAA</span></strong><strong>، صورت گرفت. به منظور اثبات حضور ژن </strong><strong><em><span dir="LTR">gus</span></em></strong><strong>، واکنش زنجیره&shy;ای پلیمراز انجام شد و وجود این ژن را در هر دو ریزنمونه جنین وطبق پیاز، که به آزمون هیستوشیمیایی </strong><strong><em><span dir="LTR">gus</span></em></strong><strong> پاسخ مثبت داده بودند، اثبات کرد. همچنین عدم آلودگی ناشی از آگروباکتریوم در گیاهان تراریخته </strong><strong>بااستفاده ازآغازگرهای</strong><strong> اختصاصی ژن </strong><strong><em><span dir="LTR">virG</span></em></strong><strong> به کمک واکنش زنجیره&shy;ای پلیمراز </strong><strong>تأیید شد. </strong><strong>در این تحقیق کارایی تراریزش در ریزنمونه جنین 10 درصد و در ریزنمونه طبق پیاز6/6 درصد محاسبه شد</strong><strong><span dir="LTR">.</span></strong></p> <p dir="RTL"></p><p dir="RTL"></p> <table align="left" cellpadding="0" cellspacing="0" hspace="0" vspace="0"> <tbody> <tr> <td align="left"><p></p></td> </tr> </tbody> </table> <div style="clear:both;"></div> <p>Shallot (<em>Allium stipitatum</em>) is an edible vegetable that has important pharmacological properties. Therefore, optimization of an efficient <em>in vitro </em>regeneration and transformation system for shallot breeding through genetic engineering would be useful. Embryo, root and bulb explants of shallot were cultured <em>in vitro</em> on MS basal medium supplemented with different concentrations of growth regulators (NAA, 2,4-D and BA) for callus induction and plantlet regeneration. Explants were transformed using <em>Agrobacterium tumefaciens</em> strain LBA4404 and pBI121 plasmid carrying the <em>gus</em> reporter gene. The results indicated that bulb had a higher efficiency of callus induction and plantlet regeneration (100%) compared to embryo and root explants. The highest percentage of regeneration (100 %) was observed on MS medium supplemented with 5 mg.l^-1 BA and 1 mg.l^-1 NAA for bulb explants. Polymerase chain reaction (PCR) analysis of <em>gus</em>-positive transformants confirmed genetic transformation of the cultures. Furthermore, the lack of <em>Agrobacterium</em>-related infection was confirmed using <em>vir</em>G-specific markers. In this study, the efficiency of transformation was 10 and 6.6% in embryo and bulb, respectively.</p> آگروباکتریوم, انتقال ژن, ژن gus , کشت بافت, موسیر Agrobacterium, GUS gene, Gene transformation, Shallot, Tissue culture 91 101 http://gebsj.ir/browse.php?a_code=A-10-175-1&slc_lang=fa&sid=1 Abolfazl Hajiheidar ابوالفضل حاجی حیدر 10031947532846001547 10031947532846001547 No Islamic Azad University دانشگاه آزاد اسلامی Masoud Tohidfar مسعود توحیدفر 10031947532846001548 10031947532846001548 Yes Shahid Beheshti University دانشگاه شهید بهشتی Mehdi Miri مهدی میری 10031947532846001549 10031947532846001549 No Islamic Azad University دانشگاه آزاد اسلامی