fa بهینه سازی انتقال ژن به جو و تولید گیاهان تراریخته بارور با استفاده از آگروباکتریوم مهندسی ژنتیک گیاهی Plant پژوهشي Research <p dir="RTL"><strong><span style="font-family:b zar;">در سال&shy;های اخیر انتقال ژن به غلات به ابزار مهمی برای بهبود صفات زراعی گیاهان تبدیل شده است. جو یکی از با اهمیت&shy; ترین غلات دانه&shy; ای است که </span></strong><strong><span style="font-family:b zar;">اصلاح آن برای افزایش تحمل به تنش&shy;های زیستی و غیرزیستی از طریق انتقال ژن همانند سایر گیاهان زراعی از اهمیت زیادی برخوردار است. بهینه&shy; سازی عوامل مختلف موثر در تراری</span></strong><strong><span style="font-family:b zar;">زش</span></strong><strong><span style="font-family:b zar;"> و باززایی گیاهان تراریخته اولین قدم در برنامه&shy; های انتقال ژن به گیاهان محسوب می&shy;شود. در این پژوهش برخی عوامل موثر در تراریزش جو به وسیله آگروباکتریوم مانند </span></strong><strong><span style="font-family:b zar;">سویه</span></strong> <strong><span style="font-family:b zar;">باکتری، غلظت آگروباکتریوم، مدت زمان هم&shy;کشتی و محیط تلقیح باکتری مورد بررسی قرار گرفت. برای تاییدحضور ژن&shy;های انتقالی در گیاهان تراریخته احتمالی از آزمون</span></strong><strong><span dir="LTR"> PCR </span></strong><strong><span style="font-family:b zar;">و برای بررسی بیان ژن&shy;های انتقالی </span></strong><strong><span style="font-family:b zar;">از </span></strong><strong><span style="font-family:b zar;">آزمون بیان ژن </span></strong><strong><span dir="LTR">GFP</span></strong> <strong><span style="font-family:b zar;">استفاده شد</span></strong><strong><span style="font-family:b zar;">. باززایی ریزنمونه&shy; های تراریخته با موفقیت انجام و گیاهان تراریخته بارور حاصل گردید. نتایج نشان داد که </span></strong><strong><span style="font-family:b zar;">سویه</span></strong> <strong><span dir="LTR">LBA4404</span></strong><strong><span style="font-family:b zar;"> و </span></strong><strong><span dir="LTR">AGL1</span></strong> <strong><span style="font-family:b zar;">به عنون موثرترین </span></strong><strong><span style="font-family:b zar;">سویه</span></strong><strong><span style="font-family:b zar;">&shy; های آگروباکتریوم و غلظت 1=</span></strong><strong><span dir="LTR"> OD</span></strong><strong>_{<span dir="LTR">600</span>}</strong><strong><span style="font-family:b zar;">به عنوان مناسب&shy;ترین غلظت در تراریزش ریزنمونه&shy; های جنین نارس جو عمل کرده&shy; اند</span></strong><strong><span style="font-family:b zar;">. همچنین استفاده از محیط تلقیح </span></strong><strong><span dir="LTR">LB</span></strong><strong><span style="font-family:b zar;"> و </span></strong><strong><span style="font-family:b zar;">مدت زمان هم&shy;کشتی دو روزه ریزنمونه&shy; ها با</span></strong><strong><span style="font-family:b zar;"> آگروباکتریوم، بیشترین میزان تراریزش در جو را بدنبال دا</span></strong><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:12.0pt;">شت</span></span><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:12.0pt;">.</span></span></p> <p>In recent years, gene transfer to cereal crops has become an important tool for improving agronomic traits. Barley is one of the most important cereals and like other crops its modification by genetic transformation is an important method for increasing tolerance to biotic and abiotic stresses. Optimization of the various factors that can influence transformation and regeneration of the target plant is the first step in the gene transfer. In this research, some of the factors influencing transformation of barley with Agrobacterium such as the Agrobacterium strain, bacterial concentration, co-cultivation period and Agrobacterium infection medium were investigated. To confirm the presence of possible transferred genes in the transgenic plants, a PCR test was done and expression of the transferred gene was carried out using a GFP gene expression test. Regeneration of transgenic explants was carried out successfully and fertile transgenic plants were obtained. The results showed that in the transformation of immature embryo explants of barley, the LBA4404 and AGL1 Agrobacterium strains were the most effective strain and a concentration of OD600=1 was the optimal bacterial concentration. Also, the usage of LB as the inoculation medium and a 2<span dir="RTL">-</span>days co-cultivation period of explants with Agrobacterium resulted in maximum transformation of barley.</p> آگروباکتریوم, تراریزش, جو, هیگرومایسین و GFP. Agrobacterium, Barley, GFP, Hygromycin, Transformation. 131 142 http://gebsj.ir/browse.php?a_code=A-10-192-1&slc_lang=fa&sid=1 Ebrahim Doranie Uliaie ابراهیم دورانی علیایی uliaie@yahoo.com 10031947532846001488 10031947532846001488 Yes Agricultural Biotechnology, Department of Plant Breeding and Biotechnology, Faculty of Agriculture, University of Tabriz, Iran گروه به نژادی و بیوتکنولوژی گیاهی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه تبریز Vahid Mehrizadeh وحید مهری زاده vahidmehrizade@yahoo.com 10031947532846001489 10031947532846001489 No Agricultural Biotechnology, Department of Plant Breeding and Biotechnology, Faculty of Agriculture, University of Tabriz, Iran گروه به نژادی و بیوتکنولوژی گیاهی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه تبریز