fa تعیین توالی و بررسی خصوصیات مولکولی ژن بتا 1 و 4 اندوگلوکاناز سویه Bacillus subtilis B5d مهندسی ژنتیک جانوری Animal پژوهشي Research <p><strong><span dir="RTL">این پژوهش به منظور تعیین برخی ویژگی‌های </span><span dir="RTL">کاتالیتیکی</span> <span dir="RTL">و خصوصیات مولکولی ژن کدکننده آنزیم بتا 1و4 اندوگلوکاناز در سویه</span><em>Bacillus subtilis</em> B5d <span dir="RTL">&nbsp;انجام شد. ژن کدکننده این آنزیم در سویه </span>&nbsp;B5d<span dir="RTL"> توسط</span> <span dir="RTL">آغازگرهای</span> <span dir="RTL">اختصاصی تکثیر، تعیین توالی و در پایگاه اطلاعاتی </span>NCBI<span dir="RTL"> ثبت شد. تجزیه توالی حاصله و رسم درخت فیلوژنی با استفاده از نرم‌افزار </span>Vector NTI<span dir="RTL"> و </span>Mega.4<span dir="RTL"> انجام شد. براساس نتایج حاصله قطعه تعیین توالی&shy;شده شامل 794 نوکلئوتید بود که یک رشته پپتیدی با 264 اسیدآمینه را کد می‌کند. تجزیه توالی آمینواسیدی این ژن در سویه مورد بررسی نشان&shy;داد که آنزیم اندوبتاگلوکاناز تولید&shy;شده توسط سویه مورد پژوهش چندبخشی بوده که قسمت باند شونده به سلولز (</span>Cellulose Binding Domain, CBD<span dir="RTL">) آن مربوط‌به خانواده گلیکوزیدهیدرولاز 3 و قسمت کاتالیک (</span>CD<span dir="RTL">) آنزیم مورد بررسی متعلق به خانواده گلیکوزیدهیدرولاز 5 است. همچنین فعالیت آنزیم بتا 1و4 اندوگلوکاناز تولید شده توسط سویه‌ </span>B5d<span dir="RTL">، در محدوده دمایی 70-30 درجه سانتی‌گراد و </span>pH<span dir="RTL"> 6/4 مورد بررسی قرار گرفت. نتایج نشان‌داد که بیشترین فعالیت</span> <span dir="RTL">کاتالیتیک آنزیم بتا 1و4 اندوگلوکاناز در دمای 55 درجه سانتی‌گراد بوده که </span>U/L<span dir="RTL"> 83/461 برآورد شد. بررسی پایداری آنزیم در شرایط دمایی و </span>pH<span dir="RTL">‌های مختلف نشان‌داد که تا دمای 60 درجه سانتی‌گراد و در محدوده </span>pH<span dir="RTL"> 10-5 آنزیم پایداری بهتری دارد</span></strong></p> <table align="left" cellpadding="0" cellspacing="0" hspace="0" vspace="0"> <tbody> <tr> <td align="left"><p></p></td> </tr> </tbody> </table> <div style="clear:both;"></div> <p>the present investigation was conducted to characterize enzymatic and molecular aspects of a beta 1 and 4 endoglucanase gene in <em>Bacillus subtilis strain </em>B5d.The gene was amplified with specific primers and its sequence was deposited in the NCBI (accession number ofKF670724).&nbsp; Sequence and phylogenetic analyses were performed using the Vector NTI and Mega 4 software. The PCR product comprised of 794 bp, encoding a peptid of 264 amino acids in length. Amino acid sequence analysis showed that the gene encoding beta 1 and 4 endoglucanase in <em>B. subtilis</em> B5d had multiple domains including cellulose binding domain belongs to family 3 and catalytic domain belong to glycoside hydrolase family 5.The enzyme activity was assessed in temperature range of 30-70 &deg;C and pH 4.6. The results showed that the maximum catalytic activity of the enzyme occurred at 55 &deg;C and was estimated at 461.83 U/L. The stability of the enzyme was measured at different pH and temperatures values and the results showed that the enzyme was stable at pH 5-10 and temperature values up 60 &deg;C.</p> تجزیه فیلوژنی باسیلوس سابتیلیس پایداری آنزیمی ژن بتا 1و4 اندوگلوکاناز سویه B5d Beta 1 and 4 endoglucanase, Bacillus subtilis, Phylogenetic analysis, Enzyme stability. 101 110 http://gebsj.ir/browse.php?a_code=A-10-99-3&slc_lang=fa&sid=1 Sholeh Dah Pahlavan شعله ده پهلوان 10031947532846001610 10031947532846001610 No Urmia University, Urmia, I. R. Iran. دانشکده علوم‌پایه دانشگاه ارومیه Maryam Musavivand مریم موسویوند 10031947532846001611 10031947532846001611 No Department of Microbial Biotechnology, Agricultural Biotechnology Research Institute of Iran(ABRII), Agricultural Research Education and Extension Organization (AREO), Karaj, Iran. بخش تحقیقاتی بیوتکنولوژی میکروبی و پژوهشکده بیوتکنولوژی کشاورزی ایران- سازمان تحقیقات ، آموزش و ترویج کشاورزی- کرج- ایران Maryam Hashemi مریم هاشمی hashemim@abrii.ac.ir 10031947532846001612 10031947532846001612 Yes Department of Microbial Biotechnology, Agricultural Biotechnology Research Institute of Iran(ABRII), Agricultural Research Education and Extension Organization (AREO), Karaj, Iran. بخش تحقیقاتی بیوتکنولوژی میکروبی و پژوهشکده بیوتکنولوژی کشاورزی ایران- سازمان تحقیقات ، آموزش و ترویج کشاورزی- کرج- ایران Jalil Khara جلیل خارا 10031947532846001613 10031947532846001613 No Urmia University, Urmia, I. R. Iran. دانشکده علوم‌پایه دانشگاه ارومیه