fa تشخیص مولکولی ذرت‌های تراریخته براساس پیشبر P35S مهندسی ژنتیک جانوری Animal پژوهشي Research <p dir="RTL"><strong>در دو دهه‌ی اخیر مهندسی ژنتیک با استفاده از علم بیوتکنولوژی باعث تولید محصولات تراریخته در جهان شده است. آمار رو به رشد سطح کشت محصولات تراریخته در سرتاسر دنیا حاکی از اهمیت ویژه‌ی تراریخته‌ها و افزایش استفاده‌ی عموم مردم از این مواد غذایی است. ذرت یکی از مهمترین محصولات تراریخته است که در بسیاری از کشورها به‌میزان زیادی کشت و مصرف می‌شود. هدف از این پژوهش شناسایی ذرت‌های تراریخته با استفاده از روش مولکولی حساس و اختصاصی واکنش زنجیره‌ای پلیمراز (پی.سی.آر) است که قابلیت جداسازی موادغذایی تراریخته از غیرتراریخته را دارا است. این پژوهش انجام شده با هدف تشخیص ذرت‌های تراریخته در سبدکالای مصرف‌کنندگان ایرانی بر پایه‌ی (پی.سی.آر) و آغازگر اختصاصی </strong><strong><span dir="LTR">P35S</span></strong><strong> است. در پژوهش‌های پیشین در ایران چند نمونه ذرت مشخص یا وارداتی در ایران مورد بررسی قرار گرفته بود. در این پژوهش سه نمونه‌ی تراریخته ذرت از گمرک شیراز تهیه و دی.ان.اِ سی‌و‌هفت نمونه‌ی ذرت جمع‌آوری شده از بازارمصرف هفت شهر بزرگ و شش نمونه ذرت جهادکشاورزی، به‌روش استاندارد</strong><strong><span dir="LTR">CTAB </span></strong><strong>&nbsp;(ستیل‌تری‌متیل‌آمونیوم‌بروماید) استخراج شد. آزمون پی.سی.آر شناسایی ذرت با استفاده از ژن‌بومی اینورتاز</strong><strong><em><span dir="LTR">IVR</span></em></strong><strong><span dir="LTR">) </span></strong><strong>&nbsp;که در تمام ارقام ذرت وجود دارد) انجام شد. جهت</strong> <strong>شناسایی</strong> <strong>ذرت‌های تراریخته آزمون پی.سی.آر براساس پیشبر </strong><strong><span dir="LTR">P35S</span></strong><strong> (آغازگر اختصاصی </strong><strong><span dir="LTR">CaMV 35s</span></strong><strong> موجود اکثر وکتورها</strong><strong><span dir="LTR"> (</span></strong><strong>با آغازگرهای اختصاصی </strong><strong><span dir="LTR">P35S2</span></strong><strong> و </strong><strong><span dir="LTR">P35S1</span></strong><strong> بهینه شد. محصول</strong><strong><em><span dir="LTR">IVR </span></em></strong><strong>&nbsp;و </strong><strong><span dir="LTR">P35S</span></strong><strong> جهت تعیین توالی و تهیه کنترل مثبت کلون شد. آزمون پی.سی.آر ژن </strong><strong><em><span dir="LTR">IVR</span></em></strong><strong> و پیشبر</strong><strong><span dir="LTR">P35S </span></strong><strong>&nbsp;بر روی نمونه‌ها بهینه &shy;سازی و آمپلیکون</strong><strong><span dir="LTR"> 226 bp </span></strong><strong>و </strong><strong><span dir="LTR">195 bp</span></strong><strong> به‌ترتیب تکثیر شد. هر دو محصول پی.سی.آر به‌روش </strong><strong><span dir="LTR">T/A Cloning</span></strong><strong> و با استفاده از پلاسمید</strong><strong><span dir="LTR">pTZ57R </span></strong><strong>&nbsp;و میزبان</strong><strong><span dir="LTR">JM107E.coli </span></strong><strong>&nbsp;کلون شد. از میان چهل و شش نمونه ذرت جمع‌آوری شده از بازارمصرف، گمرک و جهادکشاورزی 100 درصد به‌لحاظ ژن‌بومی اینورتاز و 56.5 درصد (26 عدد) از نمونه‌ها به‌لحاظ اگزوژن </strong><strong><span dir="LTR">P35S</span></strong><strong> دارای جواب مثبت بودند. این پژوهش نشان می‌دهد که درصدبالایی از ذرت‌های مصرفی در بازار ایران براساس واکنش زنجیره‌ای پلیمراز تراریخته است. با این وجود هیچ اقدامی جهت برچسب گذاری و آگاهی مصرف‌کننده صورت نگرفته است.</strong></p> <p>in the past two decades, biotechnology in genetic engineering has led the production of genetically modified organisms (GMOs) all around the world. The statistics of GMO cultivation has lightened the significant importance of GMOs worldwide, and shows that they are widely consumed by public. Maize is one of the most important transgenic crops which has widely cultivated and consumed in many countries. The aim of this study is the detection of genetically modified maize in Iran markets. First, three samples of transgenic maize were prepared from Shiraz&rsquo;s Custom and their DNA was extracted using Cetyl Tri-methyl Ammonium Bromide (CTAB) method. The control PCR test of native maize was performed on Invertase (IVR) gene which is present in all corn types. For detection of genetically modified maize, the PCR test based on P35S promoter which present in most transformation vectors was optimized using specific primers (P35S1 and P35S2). Then, DNA of 37 maize samples collected from seven major cities of Iran and six maize samples from Jihad Agriculture Organization were extracted. PCR tests for the IVR gene and P35S were performed. Respectively, the 226 bp and the 195 bp amplicons were amplified. PCR products were cloned by T/A cloning in JM107 using <em>pTZ57R</em> plasmid for sequencing and preparing the positive controls. 46 samples collected from the market, Customs and Jihad Agriculture Organization were shown to be 100% positive for the native IVR gene and 56.5% (26 samples) positive for the exogenous P35S. This study showed that a high percentage of transgenic maize is present in Iran&rsquo;s consumption market. However, no action has been taken toward labeling and the consumer awareness of these food products.</p> پیشبرP35S ذرت تراریخته واکنش زنجیره‌ای پلیمراز واردات مهندسی ژنتیک Transgenic maize, PCR, P35S Promoter. 111 118 http://gebsj.ir/browse.php?a_code=A-10-99-4&slc_lang=fa&sid=1 Diyana Heidari دیانا حیدری Diana2730@yahoo.com 10031947532846001614 10031947532846001614 Yes Pardis International, University of Guilan. پردیس‌دانشگاهی دانشگاه گیلان Mohammad hasan Shahhoseini محمد حسن شاه حسینی 10031947532846001615 10031947532846001615 No Islamic Azad University shahre ghods branch, Tehran, Iran. دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران موسسه ایرانیان ژن فناور(IGF)، تهران، ایران Zivar Salehi زیور صالحی 10031947532846001616 10031947532846001616 No , University of Guilan. دانشکده علوم‌پایه، دانشگاه گیلان