Genetic Engineering and Biosafety Journal

fa کاربرد ژنتیک معکوس در مطالعه کارکرد ژن شبه استریکتوسیدین سینتاز- 6 آرابیدوپسیس تالیانا در پاسخ به تنش شوری Reverse Genetic Application in functional study of Arabidopsis thaliana strictosidine synthase Like-6 gene under salt stress مهندسی ژنتیک گیاهی Plant پژوهشي Research ژنهای شبه استریکتوسیدین سینتاز (SSL) از خانوادههای ژنی موجود در ژنوم آرابیدوپسیس هستند. اورتولوگهای این خانواده در سایر گیاهان نظیر پریوش (Catharanthus roseus) آنزیمهای کلیدی مسیر بیوسنتز ایندول آلکالوئیدهای مونوترپنوئیدی هستند. ژن SSL6 آرابیدوپسیس، از اعضاء خانواده ژنی SSL، در پاسخ به انواع تنشها و مولکولهای پیام رسان به صورت معنیداری القاء میشود. در این مطالعه، از روشهای ژنتیک معکوس (درج T-DNA) برای تعیین نقش کارکردی ژن SSL6 در پاسخ به تنش شوری استفاده شد. آزمایش به صورت فاکتوریل در قالب طرح کامل تصادفی با دو فاکتور و در سه تکرار انجام شد. فاکتورها شامل دو ژنوتیپ (Col-0 و ssl6) و سه سطح تیمار NaCl (0 mM, 100 mM, 200 mM) بود. در مقایسه با گیاه تیپ وحشی، افزایش تجمع پرولین و محتوای آنتوسیانین و کاهش محتوای مالون دیآلدئید (MDA) در پاسخ به تنش شوری معنیدار بود. بررسی Real Time-PCR مشخص کرد که  افزایش بیان ژنهای SOS در پاسخ به تیمار شوری 150 میلی مولار NaCl در زمانهای 3 و 6 ساعت پس از تیمار در گیاه ssl6 در مقایسه با Col-0 معنیدار است. در مجموع این نتایج نشان داد که احتمالاً ژن SSL6 نقش کنترل کننده منفی در پاسخ به تنش شوری در گیاه آرابیدوپسیس بر عهده دارد. Strictosidine synthase-like (SSL) is a group of gene family in the Arabidopsis thaliana genome, which their orthologous in other plants, such as Catharanthus roseus, are key enzymes in the monoterpenoid indole alkaloid biosynthesis pathway. Arabidopsis SSL6 gene, a member of SSL family, has been induced significantly by various stresses and signaling molecules. In this study, the reverse genetics approaches (T-DNA insertion) are used to determine the function of the SSL6 gene in response to the salt stress. The experiment was conducted using a factorial experiment based on the completely randomized design with two factors and three replications. These factors were included two genotypes (Col-0 and ssl6) and three NaCl treatments (0 mM, 100mM and 200 mM). Compared with the wild-type, the ssl6 mutant shows significantly increased proline accumulation, anthocyanin content and reduced malondialdehyde (MDA) content in response to the salt stress. Real-Time PCR analysis revealed that the expression levels of SOS genes were upregulated significantly in ssl7 compared with the expression in Col-0 in response to 150 mM NaCl at 3 h and 6 h after the treatment. Totally, these results suggest that SSL6 might have a negative regulatory role in response to salt stress in Arabidopsis. بیان ژن, تنظیم کننده منفی, ژن فاقد عملکرد, لاین T-DNA Gene Expression, Negatively Regulator, Loss of Function Gene, T-DNA Line 21 32 http://gebsj.ir/browse.php?a_code=A-10-210-2&slc_lang=fa&sid=1 Mohadece Pourkarimi Daryakenari محدثه پورکریمی دریا کناری mohadece.pourkarimi@gmail.com 10031947532846002176 10031947532846002176 No Department of Agricultural Biotechnology, Faculty of Agricultural Sciences, University of Guilan گروه بیوتکنولوژی کشاورزی، دانشکده علوم کشاورزی، دانشگاه گیلان Mohammad Mehdi Sohani محمد مهدی سوهانی* mhdsohani@gmail.com: msohani@guilan.ac.ir 10031947532846002177 10031947532846002177 Yes Department of Agricultural Biotechnology, Faculty of Agricultural Sciences, University of Guilan, Iran گروه بیوتکنولوژی کشاورزی، دانشکده علوم کشاورزی، دانشگاه گیلان Amin Abedi امین عابدی abedi.amin@yahoo.com 10031947532846002178 10031947532846002178 No Department of Agricultural Biotechnology, Faculty of Agricultural Sciences, University of Guilan گروه بیوتکنولوژی کشاورزی، دانشکده علوم کشاورزی، دانشگاه گیلان