fa انتقال ژن cry1a105 به گوجه‌فرنگی به‌منظور افزایش مقاومت به آفت Heliothis sp مهندسی ژنتیک گیاهی Plant پژوهشي Research <strong><span style="font-family:b zar;">گوجه‌فرنگی </span></strong><strong><span style="font-family:b zar;">(</span></strong><strong><em><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;">Solanum lycopersicum</span></span></em></strong><strong><span style="font-family:b zar;">)</span></strong><strong><span style="font-family:b zar;"> یکی از مهم‌ترین سبزی‌ها در جهان است که طیف وسیعی از پاتوژن ها و آفات گیاهی به این گیاه حمله می‌کنند. یکی از مهم‌ترین این آفات، لارو هلیوتیس است که عمدتاً به میوه&nbsp; و برگ خسارت زده و باعث کاهش محصول می‌شود. </span></strong><strong><span style="font-family:b zar;">ﺩﺭ ﺍﻳﻦ ﭘﮋﻭﻫﺶ ﺗﺮﻛﻴﺐ ﺳﺎﺯﻩ ژﻧﻲ </span></strong><strong><em><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;">cry1a105</span></span></em></strong><strong><span style="font-family:b zar;"> تحت راه&shy;انداز دائمی </span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;">CaMV 35S</span></span></strong><strong><span style="font-family:b zar;"> و</span></strong> <strong><span style="font-family:b zar;">خاتمه &shy;دهنده </span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;">NOS</span></span></strong> <strong><span style="font-family:b zar;">ﺩﺭ ناقل </span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;">pBI121</span></span></strong><strong><span style="font-family:b zar;"> همسانه &shy;سازی ﺷﺪﻩ</span></strong> <strong><span style="font-family:b zar;">ﻭ ﺑﻪ ﺍﮔﺮﻭﺑﺎﻛﺘﺮﻳﻮﻡ</span></strong> <strong><span style="font-family:b zar;">تومفاسینس ﺳﻮﻳﻪ </span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;">LBA4404</span></span></strong><strong><span style="font-family:b zar;"> منتقل و سپس ﺑﻪ ﮔﻴﺎﻩ </span></strong><strong><span style="font-family:b zar;">گوجه‌فرنگی</span></strong> <strong><span style="font-family:b zar;">انتقال داده شد. ریز نمونه‌های برگ لپه‌ای ﺍﺯ ﮔﻴﺎﻩ </span></strong><strong><span style="font-family:b zar;">گوجه‌فرنگی</span></strong> <strong><span style="font-family:b zar;">ﺑﺮﺍﻱ ﺗﺮﺍﺭﻳﺰﺵ مورد استفاده ﻗﺮﺍﺭ ﮔﺮﻓﺘﻨﺪ. ﮔﻴﺎﻫﺎﻥ ﺗﺮﺍﺭﻳﺨﺘﻪ احتمالی ﺑﺮ ﺭﻭﻱ ﻣﺤﻴﻂ </span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;">MS</span></span></strong><strong><span style="font-family:b zar;"> ﻫﻤﺮﺍﻩ ﺑا ﻭﻳﺘﺎﻣﻴﻦ </span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;">B5</span></span></strong><strong><span style="font-family:b zar;"> ﺣﺎﻭﻱ 3/0</span></strong> <strong><span style="font-family:b zar;">میلی‌گرم در لیتر </span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;">NAA</span></span></strong><strong><span style="font-family:b zar;"> و 5/1 میلی‌گرم ﺩﺭ ﻟﻴﺘﺮ </span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;">BAP</span></span></strong><strong><span style="font-family:b zar;"> و نیز 50 میلی‌گرم </span></strong><strong><span style="font-family:b zar;">ﺩﺭ ﻟﻴﺘﺮ ﺁﻧﺘﻲ&shy;ﺑﻴﻮﺗﻴﻚ ﻛﺎﻧﺎﻣﺎﻳﺴﻴﻦ ﺍﻧﺘﺨﺎﺏ ﺷﺪﻧﺪ. ﺗﺠﺰﻳﻪ ﻣﻮﻟﻜﻮﻟﻲ ﮔﻴﺎﻫﺎﻥ ﺗﺮﺍﺭﻳﺨﺘﻪ (</span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;">T₀</span></span></strong><strong><span style="font-family:b zar;">) ﺑﺎ ﺍﺳﺘﻔﺎﺩﻩ ﺍﺯ </span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;">PCR</span></span></strong><strong><span style="font-family:b zar;"> ﻭﺟﻮد ژن </span></strong><strong><em><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;">cry1a105</span></span></em></strong> <strong><span style="font-family:b zar;">ﺭﺍ ﺩﺭ ﮔﻴﺎﻫﺎﻥ ﺗﺮﺍﺭﻳﺨﺘﻪ تائید ﻛﺮﺩ. از </span></strong><strong><span style="font-family:b zar;">گیاهانی که </span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;">PCR</span></span></strong><strong><span style="font-family:b zar;"> مثبت نشان دادند بذرگیری به عمل آمد، گیاهان مورد نظر تا نسل </span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;">T₂</span></span></strong><strong><span style="font-family:b zar;"> کشت شدند و در این نسل وجود ژن انتقال&shy; یافته در آن‌ها با آنالیز مولکولی (</span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;">RT-PCR</span></span></strong><strong><span style="font-family:b zar;">) مورد بررسی قرار گرفت. گیاهانی که وجود ژن موردنظر در آن‌ها تائید شده بود با آزمون زیستی مورد بررسی قرار گرفتند. آزمون زیست‌سنجی مقاومت&nbsp; رقم گوجه‌فرنگی کارون را (</span></strong><strong><span style="font-family:b zar;">70%</span></strong><strong><span style="font-family:b zar;">) به آفت لارو هلیوتیس در مقایسه با شاهد نشان داد.</span></strong><br> &nbsp; Tomato (<em>Solanum lycopersicum </em>L.) is an important vegetable in the world, it exposes to a wide range of pathogens and plant pests attack. Fruit worm is one of the most important pest of tomato that mainly damage the fruit and causes the yield reduction. In this study, <em>cry1a105</em> gene was cloned to pBI121 plasmid (under 35S promoter and Nos terminator), and was transferred to tomato by <em>Agrobacterium tumefaciens</em> LBA4404 strain. The cotyledons of different tomato cultivars were used for gene transformation. The candidate transgenic plants have been selected on MS medium complemented with vitamins of B5 and 0.3 mg/L NAA, 1.5 mg/L BAP, and 50 mg/L of kanamycin antibiotic. Molecular analysis using polymerase chain reaction ( PCR ) confirmed the presence of <em>cry1a105</em> gene in transgenic plants (T₀). The candidate plants were cultivated until T₂ generation and then the expression of gene were studied by molecular analysis (RT- PCR ). The gene expression in the plants were confirmed, then they were examined by bioassay analysis. Bioassay analysis showed that the transformed Karun cultivar had a high resistance (70%) to tomato fruit worm than the control treatment.<br> &nbsp; گوجه‌فرنگی, cry1a105, اگروباکتریوم, سویه LBA4404, ناقل pBI121, Tomato, cry1a105, Agrobacterium, LBA4404 Strain, vector pBI121, 1 9 http://gebsj.ir/browse.php?a_code=A-10-314-1&slc_lang=fa&sid=1 Rasoul Golzari رسول گلزاری rasoul.golzari@znu.ac.ir 10031947532846003103 10031947532846003103 No Molecular genetics, University of Zanjan, Iran ژنتیک مولکولی دانشگاه زنجان Bahram Maleki zanjani بهرام ملکی زنجانی bmalkiz@yahoo.com 10031947532846003104 10031947532846003104 No Department of Agronomy and Plant Breeding, Faculty of Agriculture, University of Zanjan گروه زراعت و اصلاح، دانشگاه زنجان Masoud Tohidfar مسعود توحیدفر gtohidfar@yahoo.com 10031947532846003105 10031947532846003105 Yes Department of Plant Biotechnology, Faculty of Science and Biotechnology, Shahid Beheshti University, Tehran, Iran گروه بیوتکنولوژی گیاهی، دانشکده علوم و فناوری زیستی دانشگاه شهید بهشتی تهران