Genetic Engineering and Biosafety Journal

fa شناسایی مولکولی و ردیابی فیتوپلاسمای عامل بیماری تورم جوانۀ گوجه فرنگی Molecular detection and survey of tomato big bud phytoplasma in Zanjan province مهندسی ژنتیک میکروارگانیسم ها و ویروسها Microrganisms and Viruses پژوهشي Research <div style="text-align: justify;">بیماری تورم جوانۀ گوجهفرنگی یکی ازبیماریهای مهم فیتوپلاسمایی گوجه فرنگی در ایران و درجهان محسوب می شود که درآن جوانه های گیاهان آلوده به حالت متورم درآمده و در صورت شدت بیماری بوته تغییر شکل و رنگ داده و خسارت شدیدی به محصول وارد می شود. به منظور شناسایی و ردیابی عامل بیماری ابتدا از برگ، جوانه های متورم و میوه بوته های آلوده در مزارع گوجه فرنگی زنجان نمونه برداری گردید. DNA کل از اندامهای آلوده و سالم و از علفهای هرز مزارع مانند گل جالیز، اسپرک، توق، تاج خروس و پیچک استخراج شد. همچنین برای بررسی امکان انتقال بیماری با بذر و حشرات ناقل در مزرعه، DNA کل بذور گوجهفرنگی بوته های آلوده و گونههایی از مگس سفید و زنجره ها استخراج شد. ردیابی فیتوپلاسما با واکنش زنجیرهای پلیمراز (PCR) با استفاده از جفت آغازگرهایP1/P7، اختصاصی فیتوپلاسماها انجام گردید. بررسی نتایج حاصل از تکثیر اختصاصی ژنوم عامل بیماری نشان داد که در نمونه های گوجه فرنگی دارای علائم بیماری، قطعۀ DNA ریبوزومی اختصاصی فیتوپلاسما با اندازه تقریبی 1800 جفت تکثیر شد. ردیابی عامل بیماری تنها در زنجره های ناقل و در گیاه انگل گل جالیز متصل به ریشه گیاهان بیمار با موفقیت همراه بود و از بقیه علفهای هرز موجود فیتوپلاسمای عامل بیماری جداسازی نشد. با انجام این تحقیق برای اولین بار ردیابی مولکولی عامل بیماری فیتوپلاسمایی بر روی مگس سفید و گل جالیز انجام گردید و ضمن تایید عدم امکان انتقال عامل بیماری از طریق بذر و مگس های سفید، روشی سریع و دقیق برای ردیابی عامل بیماری در بوته های آلوده گوجه فرنگی و در حشرات ناقل بیماری، ارایه گردید که میتواند در پایش این بیماری در کشور استفاده شود.</div> <div style="text-align: justify;">Tomato big bud is one of the most important diseases of tomato caused by phytoplasma in Iran and all over the world. In infected tomato plants, leaves turn to purple and buds become large, swollen and green that fail to develop normally and do not set fruit. For detection of the causal pathogen, we collected some samples from leaves and swollen buds of infected tomato plants as well as from leaves of some weeds in tomato fields such as Orobanche purpurea, Reseda sp, Amaranthus sp. Xanthium strumarium. Total DNA from all collected samples was extracted. To survey the pathogen in the body of some insects that are known as vectors, samples of two species that appeared more frequently in the tomato fields (leafhoppers and whiteflies) were collected and the total DNA was extracted. Molecular detection of the big bud phytoplasma in all samples was carried out by PCR using two specific primers (P1/P7). The results showed that in infected samples of the tomato plants, a DNA fragment of 1800 bp in size was multiplied while in the control plant no DNA fragment was observed when the PCR products were visualized in the gel electrophoresis. The same size specific DNA fragment was detected only in PCR reaction coming from leafhoppers and samples of the Orbanche plant parasite. This research showed that the pathogen can be transmitted by leafhoppers and Orbanche while it cannot be transmitted by seeds and whiteflies. This molecular approach could be an effective and fast method for detection and survey of phytoplasma and other fastidious plant pathogens.</div> فیتوپلاسما, تورم جوانه, گوجه‌فرنگی, تشخیص ملکولی, PCR Phytoplasma, BigBud, tomato, Molecular detection, PCR 123 130 http://gebsj.ir/browse.php?a_code=A-10-328-1&slc_lang=fa&sid=1 Mahnaz Shokri مهناز شکری shila_pet32@yahoo.com 10031947532846005249 10031947532846005249 No MSc. of Agricultural Biotechnology Engineering, University of zanjan کارشناس ارشد مهندسی بیوتکنولوژی ، دانشکده کشاورزی، دانشگاه زنجان Hossein Jafary حسین جعفری hjafaryir@gmail.com 10031947532846005250 10031947532846005250 Yes Iranian Research Institute of Plant Protection, Agricultural Research, Education and Extension Organization (AREEO), Tehran, Iran موسسه تحقیقات گیاه پزشکی کشور، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، تهران، ایران Mohammadraza Azimi Moghadam محمدرضا عظیمی مقدم azimi@znu.ac.ir 10031947532846005251 10031947532846005251 No Department of Plant Production and Genetics. Faculty of Agriculture, University of Zanjan گروه مهندسی تولید و ژنتیک کشاورزی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه زنجان