Genetic Engineering and Biosafety Journal

fa بررسی انتقال و بیان ژن rT1 چای ترش در گندم Investigation of transformation and expression of roseltide rT1 gene in wheat مهندسی ژنتیک گیاهی Plant پژوهشي Research <div style="text-align: justify;">پپتیدهای ضد میکروبی در برابر پاتوژنهای گیاهی فعالیتهای ضد میکروبی قوی نشان میدهند و جایگزینهای خوبی برای سموم متداول هستند. در این مطالعه برای انتقال ژن پپتید ضد میکروبی rT1 گیاه چای ترش به گندم از سویه LBA4404 اگروباکتریوم حامل پلاسمید نوترکیب pBI121-rT1 استفاده شد. ریزنمونه های جنین بالغ چهار رقم گندم (سایسون، بهار، چمران و آرتا) پس از همکشتی با سوسپانسیون باکتری به محیط گزینشی کالوسدهی حاوی دو میلیگرم در لیتر 2,4-D و دو میلیگرم در لیتر Picloram به همراه 50 میلیگرم در لیتر آنتی بیوتیک کانامایسین و 500 میلیگرم در لیتر سفوتاکسیم منتقل شدند. کالوسهای جنین زا پس از رشد در محیط گزینشی، انتخاب و بعد به محیط باززایی حاوی 25 میلیگرم در لیتر کانامایسین و 250 میلیگرم در لیتر سفوتاکسیم انتقال یافتند. حضور و بیان ژن rT1 در سطح رونویسی در گیاهان تراریخت به کمک آغازگرهای اختصاصی به ترتیب با استفاده از روشهای PCR و RT-PCR تایید شد. براساس نتایج از بین 15 گیاه تراریخت احتمالی فقط 11 گیاه تراریخت بودند. از بین 11 گیاه تراریخت، پنج گیاه مربوط به رقم سایسون با درصد تراریختی 6/1، چهار گیاه مربوط به رقم بهار با درصد تراریختی 3/1 و دو گیاه مربوط به رقم چمران با درصد تراریختی 6/0 بودند. از رقم آرتا هیچ گیاه تراریختی بدست نیامد. </div> <div style="text-align: justify;">Antimicrobial peptides display powerful antimicrobial activities against a large set of plant pathogens and are a good alternative to conventional toxins. To transfer rT1 gene of Hibiscus sabdariffa to wheat, Agrobacterium tumefaciens strain LBA4404 harboring the pBI121-rT1 plasmid was used. Mature embryo explants of four wheat cultivars including the Saison, Bahar, Chamran and Arta after co-cultivated with A. tumefaciens suspension were transferred to a selective callus medium containing 2 mg/l 2,4-D, 2 mg/l Picloram, 50 mg/l Kanamycin and 500 mg/l Cefotaxime. Embryogenic calli were selected after growth in a selective medium and then transferred to a regenerative medium containing 25 mg/l Kanamycin and 250 mg/l Cefotaxime. The presence and expression of rT1 gene at the transcriptional level in transgenic plants were confirmed by PCR and RT-PCR methods respectively using specific primers. Based on the RT-PCR results, the rT1 gene was expressed in transgenic wheat plants. In this study, out of 15 possible transgenic plants, only 11 were transgenic. Among transgenic plants, five plants belonged to Saison cultivar with 1.6 transgenic percentage, four plants represented to the Bahar cultivar with 1.3 transgenic percentage and two plants belonged to the Chamran cultivar with 0.6 transgenic percentage. No transgenic plant was obtained for the Arta cultivar.</div> اگروباکتریوم, پپتید ضد میکروبی, ژن rT1, گندم تراریخت, RT-PCR Agrobacterium, Antimicrobial peptides, rT1 gene, RT-PCR, Transgenic wheat 85 96 http://gebsj.ir/browse.php?a_code=A-10-120-4&slc_lang=fa&sid=1 Shokoufeh Abdolmajidi شکوفه عبدالمجیدی abdolmajidi_sh@yahoo.com 10031947532846004788 10031947532846004788 No Biotechnology Department, Faculty of Agriculture and Natural Resources, Imam Khomeini International University (IKIU), Qazvin, Iran. گروه بیوتکنولوژی، دانشکده کشاورزی و منابع طبیعی، دانشگاه بین المللی امام خمینی، قزوین، ایران. Fatemeh Dehghan Nayeri فاطمه دهقان نیری nayeri@eng.ikiu.ac.ir 10031947532846004789 10031947532846004789 Yes Biotechnology Department, Faculty of Agriculture and Natural Resources, Imam Khomeini International University (IKIU), Qazvin, Iran. گروه بیوتکنولوژی، دانشکده کشاورزی و منابع طبیعی، دانشگاه بین المللی امام خمینی، قزوین، ایران.