|
انتقال ژن cry1a105 به گوجه‌فرنگی به‌منظور افزایش مقاومت به آفت Heliothis sp
|
رسول گلزاری   ، بهرام ملکی زنجانی ، مسعود توحیدفر* |
| گروه بیوتکنولوژی گیاهی، دانشکده علوم و فناوری زیستی دانشگاه شهید بهشتی تهران ، gtohidfar@yahoo.com |
|
|
چکیده: (4836 مشاهده) |
گوجه‌فرنگی (Solanum lycopersicum) یکی از مهم‌ترین سبزی‌ها در جهان است که طیف وسیعی از پاتوژن ها و آفات گیاهی به این گیاه حمله می‌کنند. یکی از مهم‌ترین این آفات، لارو هلیوتیس است که عمدتاً به میوه و برگ خسارت زده و باعث کاهش محصول می‌شود. ﺩﺭ ﺍﻳﻦ ﭘﮋﻭﻫﺶ ﺗﺮﻛﻴﺐ ﺳﺎﺯﻩ ژﻧﻲ cry1a105 تحت راهانداز دائمی CaMV 35S و خاتمه دهنده NOS ﺩﺭ ناقل pBI121 همسانه سازی ﺷﺪﻩ ﻭ ﺑﻪ ﺍﮔﺮﻭﺑﺎﻛﺘﺮﻳﻮﻡ تومفاسینس ﺳﻮﻳﻪ LBA4404 منتقل و سپس ﺑﻪ ﮔﻴﺎﻩ گوجه‌فرنگی انتقال داده شد. ریز نمونه‌های برگ لپه‌ای ﺍﺯ ﮔﻴﺎﻩ گوجه‌فرنگی ﺑﺮﺍﻱ ﺗﺮﺍﺭﻳﺰﺵ مورد استفاده ﻗﺮﺍﺭ ﮔﺮﻓﺘﻨﺪ. ﮔﻴﺎﻫﺎﻥ ﺗﺮﺍﺭﻳﺨﺘﻪ احتمالی ﺑﺮ ﺭﻭﻱ ﻣﺤﻴﻂ MS ﻫﻤﺮﺍﻩ ﺑا ﻭﻳﺘﺎﻣﻴﻦ B5 ﺣﺎﻭﻱ 3/0 میلی‌گرم در لیتر NAA و 5/1 میلی‌گرم ﺩﺭ ﻟﻴﺘﺮ BAP و نیز 50 میلی‌گرم ﺩﺭ ﻟﻴﺘﺮ ﺁﻧﺘﻲﺑﻴﻮﺗﻴﻚ ﻛﺎﻧﺎﻣﺎﻳﺴﻴﻦ ﺍﻧﺘﺨﺎﺏ ﺷﺪﻧﺪ. ﺗﺠﺰﻳﻪ ﻣﻮﻟﻜﻮﻟﻲ ﮔﻴﺎﻫﺎﻥ ﺗﺮﺍﺭﻳﺨﺘﻪ (T0) ﺑﺎ ﺍﺳﺘﻔﺎﺩﻩ ﺍﺯ PCR ﻭﺟﻮد ژن cry1a105 ﺭﺍ ﺩﺭ ﮔﻴﺎﻫﺎﻥ ﺗﺮﺍﺭﻳﺨﺘﻪ تائید ﻛﺮﺩ. از گیاهانی که PCR مثبت نشان دادند بذرگیری به عمل آمد، گیاهان مورد نظر تا نسل T2 کشت شدند و در این نسل وجود ژن انتقال یافته در آن‌ها با آنالیز مولکولی (RT-PCR) مورد بررسی قرار گرفت. گیاهانی که وجود ژن موردنظر در آن‌ها تائید شده بود با آزمون زیستی مورد بررسی قرار گرفتند. آزمون زیست‌سنجی مقاومت رقم گوجه‌فرنگی کارون را (70%) به آفت لارو هلیوتیس در مقایسه با شاهد نشان داد.
|
|
| واژه‌های کلیدی: گوجه‌فرنگی، cry1a105، اگروباکتریوم، سویه LBA4404، ناقل pBI121 |
|
|
متن کامل [PDF 854 kb]
(1696 دریافت)
|
نوع مطالعه: پژوهشي |
موضوع مقاله:
مهندسی ژنتیک گیاهی
دریافت: 1397/12/13 | پذیرش: 1398/4/4 | انتشار: 1398/4/23
|
|
|
|
|
|
