TY - JOUR T1 - Transformation of Hepatitis B Virus surface antigen (HBsAg) gene into Tobacco plants TT - انتقال ژن آنتی ژن سطحی ویروس هپاتیت Bبه گیاه توتون JF - gebsj JO - gebsj VL - 5 IS - 1 UR - http://gebsj.ir/article-1-105-fa.html Y1 - 2016 SP - 23 EP - 30 KW - Agrobacterium KW - Edible Vaccine KW - Gene Transformation KW - HBsAg Gene KW - Transgenic Tobacco N2 - یکی از شایع­ترین آلودگی­های ویروسی انسانی در سراسر جهان آلودگی ویروس هپاتیت Bاست. مؤثرترین شیوه برای کنترل و درمان این بیماری، تزریق واکسن می­باشد، اما با توجه به گران بودن داروهای شیمیایی، تولید پروتئین نوترکیب ویروس هپاتیت B به عنوان واکسن خوراکی در گیاهان طی چند سال گذشته با بیورآکتور­های مناسب برای تولید ارزان و فراوان اهمیت یافته است. بنابراین در این پژوهش سعی شده است که ژن HBsAg با کمترین هزینه به گیاه مدل توتون منتقل شود. بدین­منظور ابتدا ناقل دوگانهpCAMBIA 1304 حاوی ژن HBsAg در باکتری Escherichia coli سویهJM107 و اگروباکتریوم سویه LBA4404 کلون و به روش قطعات برگی به گیاه توتون منتقل شد. باززایی ریزنمونه­های تلقیح شده در محیط­کشت انتخابی MS حاوی 500 میلی­گرم در لیتر سفوتاکسیم و 15 میلی­گرم در لیتر هیگرومایسین و همچنین تنظیم­کننده­های رشد در غلظت­های یک میلی­گرم در لیتر BAP و یک دهم میلی­گرم در لیتر NAA انجام گرفت. در آخر پس از رسیدن گیاهچه­های غربال شده به ارتفاع 15 سانتیمتر، به روش CTAB از گیاهان تراریخته احتمالی DNA استخراج شد و جهت شناسایی و تأیید حضور ژن با آغازگرهای اختصاصی واکنش PCR و جهت بررسی بیان ژن واکنش RT-PCR انجام گرفت و بدین ترتیب حضور و بیان این ژن در گیاهان تراریخته توتون تأیید شد M3 ER -