fa غربالگری موتاسیون آرابیدوپسیس تاریخته در مسیر ژنتیک فعالیت نواحی کنترلی ژن متالوتایونین جو مهندسی ژنتیک گیاهی Plant پژوهشي Research <strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:14.0pt;">به منظور بررسی تغییرات عوامل انتقال در مسیر فعالیت پیشبر ژن متالوتایونین جو از روش غربالگری موتاسیونی استفاده شد. با شناسایی ناحیه پیشبر ژن مزبور در گیاه جو و ترکیب آن با ژن گزارشگر گاس، انتقال ترکیب حاصل به گیاه مدل آرابیدوپسیس صورت گرفت. بذور</span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">M₀</span></span></span></strong> <strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:14.0pt;">تراریخته حاصله توسط 4 دوز (10، 20، 30، 40 واحد) نوترون پرسرعت بمباران شدند. بر اساس نتایج آماری در یک طرح کاملا تصادفی ترکیب شیمیایی تری آمینوترایزول </span></span></strong><strong><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">(</span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">3-AT</span></span></span></strong><strong><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">)</span></span></strong><strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:14.0pt;"> در غلظت 20 میلی مولار به عنوان بهترین محرک فعالیت ژن گاس (پیشبر متالوتایونین) شناسایی شد. گیاهچه های نسل </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">M₂</span></span></span></strong> <strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:14.0pt;">48 ساعت پس از محلول پاشی با </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">3-AT</span></span></span></strong><strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:14.0pt;"> غلظت 20 میلی مولار برای تفرق نسبت 3 به 1 بیان ژن گاس روش سنجش بیوشیمیایی پروتئین گاس ارزیابی شدند. از مدل ممانعت که نسبت 75 درصد بیان گاس و 25 درصد عدم بیان را شامل می شد، جهت شناسایی عوامل کنترلی استفاده شد. طی چندین نوبت ارزیابی تعداد 30 گیاهچه 1500 لاین جهیده </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">M₂</span></span></span></strong> <strong><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:14.0pt;">&nbsp;بررسی شد. در نهایت 20 لاین به عنوان کاندید مناسب برای جهیده مورد نظر در مسیر فعالیت پیشبر مزبور معرفی شد. ترکیب لاین های کاندید شامل 3، 9، 5 و 3 بود که به ترتیب مربوط به تیمارهای 30، 20، 10 و 40 واحد نوترون پرسرعت بودند. لاین های مزبور جهت بررسی دقیق تر با استفاده از روش طیف سنجی فعالیت پروتئین گاس مورد ارزیابی قرار گرفته و به عنوان جهیده های احتمالی در مسیر فعالیت پیشبر ژن متالوتاینین جهت انجام پژوهش های بعدی معرفی شدند.</span></span></strong> In order to search for signaling factors altering the expression of barley metallothionein promoter, the mutant screening technique was used. The promoter region of metallothionein in barley (cv. Hordea) was used to drive the <em>gus </em>gene and it was transferred to <em>Arabidopsis thaliana</em>. The M0 seeds was mutagenized using four doses (10, 20, 30, 40 Grays) of fast Neutron radiation. The chemical compound of 3-Amino-1,2,4-Triazole (3-AT) at 20 mM was chosen as the best activator using CRD statistical design. Inheritance of GUS activity was evaluated using histochemical GUS assay. 48 hours after spraying by 20 mM 3-AT the inhibition model of 3:1 GUS ex<illegal tag>pression: non expression was tested. 20 potential mutant lines were selected by carrying out several screening steps. In each stage 30 seedlings of 1500 M2 lines were checked by GUS staining. The arrangement of promising lines included 3, 5, 9 and 3 which were referred to 10, 20, 30 and 40 Gray of fast Neutron treatments respectively. These lines were analyzed using fluorometric b-glucuronidase technique and were selected as potential mutants in genetic pathways of metallothionein promoter activity for further studies. جو زراعی, نوترون های پرسرعت, موتاسیون, پیشبر متالوتاینین, ژن گاس Barley, Fast Neutron, Mutation, Metallothionein Promoter, gus Gene. 9 14 http://gebsj.ir/browse.php?a_code=A-10-250-1&slc_lang=fa&sid=1 Saeid Navabpour سعید نواب پور s.navabpour@gau.ac.ir 10031947532846001724 10031947532846001724 Yes Hossein Saburi حسین صبوری hos.sabouri@gmail.com 10031947532846001725 10031947532846001725 No