fa بهینه سازی باززایی و انتقال ژن به لیموترش (Citrusaurantifolia) به کمک اگروبا کتریم و ژن گزارشگر gus مهندسی ژنتیک گیاهی Plant پژوهشي Research <span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:14.0pt;">لیموترش یکی از مهمترین و اقتصادی ترین محصولات باغی در جنوب ایران&nbsp; و نسبت به بیماری هایی از جمله ویروس تریستیزای مرکبات</span></span> <span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">(</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">CTV</span></span></span><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">)</span></span>&nbsp; <span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:14.0pt;">جاروی جادوگر </span></span><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">(</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">WBDL</span></span></span><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">)</span></span> <span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:14.0pt;">حساس است. بنابراین بهینه سازی یک سیستم باززایی و تراریزش کارآمد در این گیاه جهت بهبود و اصلاح آن از طریق مهندسی مهندسی ژنتیک ضروری است. به همین منظور بهینه سازی باززایی و تراریزش لیموترش با استفاده&nbsp; از قطعات میانگره و قطعات اپی کوتیل سفید در دو محیط کشت باززایی با </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">EHA105</span></span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:14.0pt;">، و پلاسمید </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">pBI</span></span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:14.0pt;"> حاوی کاست ژن </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">gus</span></span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:14.0pt;"> به صورت آزمایش های فاکتوریل در قالب طرح کاملا تصلدفی در 4 تکرار انجام شد. از بین دو ریزنمونه بکار رفته، ریزنمونه اپی کوتیل سفید نسبت به میانگره کالوس زایی و باززایی بالاتری داشت. اما بین دو محیط کشت باززایی مورد پژوهش، سویه </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">EHA105</span></span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:14.0pt;"> به عنوان بهترین سویه اگروباکتریوم جهت تراریزش و باززایی لیموترش شناخته شدند. با استفاده از واکنش زنجیره ای پلیمراز با آغازگرهای اختصاصی ژن </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">gus</span></span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:14.0pt;"> بر روی دی.ان.ای استخراجی از تمامی گیاهان باززا شده 21 شاخساره دارای این ژن بدست آمد اما تنها 8 شاخساره بیان این ژن را نشان دادند. همچنین عدم آلودگی ناشی از آگروباکتریوم در&nbsp; شاخساره های تراریخته به کمک </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">PCR</span></span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:14.0pt;"> ژن های اختصاصی </span></span><em><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">vir</span></span></span></em><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">G</span></span></span><span style="font-family:b mitra;"><span style="font-size:14.0pt;"> تایید شد. &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;</span></span> Mexican lime is one of the most important and economic fruit crops in the southern regions of Iran. This crop is susceptible to Citrus Tristeza Virus (CTV) and Witches Broom Disease of Lime (WBDL). Therefore, optimization of regeneration and transformation system for this plant is necessary for its improvement. In this project, the effect of different factors such as internode and epicotyl explants; two different regeneration media containing different concentrations of BAP and NAA, different Agrobacterium strains: &ldquo;LBA4404&rdquo; and &ldquo;EHA105&rdquo;, each harboring a binary vector pBI were studied in a factorial experiment. The results showed that the etiolated epicotyl was the best explants for regeneration and callus production. There was no significant difference between two regeneration media. Furthermore, EHA105 was the best <em>Agrobacterium </em>strain for this purpose. Polymerase Chain Reaction (PCR) using <em>gus</em>-specific primers has been carried out on DNA extracted from all regenerated plants. Twenty-one shoots were carrying this gene but only 8 shoots out of these 21 showed the expression of this gene. Furthermore, the lack of <em>Agrobacterium</em>-related infections has been confirmed using <em>vir</em>G-specific markers. آگروباکتریوم, انتقال ژن, ژن gus, لیموترش, مهندسی ژنتیک Agrobacterium, Transformation, Mexican Lime, gus Gene, Genetic Engineering. 23 36 http://gebsj.ir/browse.php?a_code=A-10-143-2&slc_lang=fa&sid=1 Maedeh Feizbakhsh مائده فیض بخش 10031947532846001746 10031947532846001746 No Masuod Tohidfar مسعود توحیدی فر gtohifar@abrii.ac.ir 10031947532846001747 10031947532846001747 Yes Hasan Marashi حسن مرعشی marashi@um.ac.ir 10031947532846001748 10031947532846001748 No Nasrin Moshtaghi نسرین مشتاقی nasimeturism@gmail.com 10031947532846001749 10031947532846001749 No Motahare Mohsenpoor مطهره محسن پور mthrhm@yahoo.com 10031947532846001750 10031947532846001750 No Mohsen Mardi محسن مردی mardi@abrii.ac.ir 10031947532846001751 10031947532846001751 No