fa جداسازی ومطالعه پیشبر ژن اوژنول O-متیل ترانسفراز (EOMTs) گیاه ریحان مهندسی ژنتیک گیاهی Plant پژوهشي Research <div style="text-align: justify;"><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b zar;">ریحان </span></span></strong><strong><em><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">Ocimum basilicum </span></span></span></span></em></strong><strong><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">L.</span></span></span></span></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b zar;"> (48</span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">n=</span></span></span></span></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b zar;">2)، گیاهی دارویی و معطر از تیره نعناعیان است. اوژنول یکی از ترکیبات مهم فنیل پروپانوئیدی موجود در اسانس ریحان است که</span></span></strong> <strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b zar;">بر</span></span></strong> <strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b zar;">علیه</span></span></strong> <strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b zar;">باکتری&shy;ها،</span></span></strong> <strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b zar;">قارچ‌ها، نماتدها، حشرات در صنایع مختلف مورد استفاده قرار می&shy;گیرد. فنیل&shy; پروپانوئیدها از جمله متیل اوژنول با داشتن خاصیت آنتی اکسیدانتی بر علیه رادیکال&shy;های آزاد </span></span></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b zar;">ترکیبی حفاظتی </span></span></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b zar;">در پاسخ به تنش&shy;های زیستی و غیر&shy;زیستی به شمار می&shy;آید.</span></span></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b zar;"> متیل اوژنول </span></span></strong><strong><em><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">O</span></span></span></span></em></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b zar;">-متیل ترانسفراز (</span></span></strong><strong><em><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">EOMTs</span></span></span></span></em></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b zar;">) به عنوان یک آنزیم کلیدی در مسیر بیوسنتز فنیل پروپانوئیدها، متیلاسیون </span></span></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b zar;">اوژنول</span></span></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b zar;"> به متیل </span></span></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b zar;">اوژنول</span></span></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b zar;"> را انجام می&shy;دهد</span></span></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b zar;">. در تحقیق حاضر، برای بررسی احتمال تنظیم بیان ژن اوژنول </span></span></strong><strong><em><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">O</span></span></span></span></em></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b zar;">-متیل ترانسفراز در شرایط مختلف محیطی و </span></span></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b zar;">شناسایی موتیف&shy;های تنظیمی،</span></span></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b zar;"> پیشبر این ژن از گیاه ریحان جداسازی و در ناقل </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">pTG19-T</span></span></span></span></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b zar;"> همسانه &shy;سازی و سپس توالی&shy;یابی شد. سپس مشخصه&shy;یابی و بررسی عملکردی آن با استفاده از روش&shy;های تجزیه بیوانفورماتیکی انجام شد. </span></span></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b zar;">نتایج تجزیه پیشبر ژن </span></span></strong><strong><em><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">EOMTs</span></span></span></span></em></strong> <strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b zar;">(</span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">bp</span></span></span></span></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b zar;"> 1209) </span></span></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b zar;">نشان داد که این توالی شامل عناصر مهم تنظیمی پاسخ&shy; دهنده به دمای بالا و تنش خشکی از جمله </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">MYB</span></span></span></span></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b zar;">، </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">MYC</span></span></span></span></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b zar;">،</span></span></strong> <strong><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">HSE</span></span></span></span></strong> <strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b zar;">و </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">WRKY</span></span></span></span></strong> <strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b zar;">است. </span></span></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b zar;">بیان موقت ژن گزارشگر </span></span></strong><strong><em><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">GUS</span></span></span></span></em></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b zar;"> تحت کنترل پیشبر </span></span></strong><strong><em><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">ObEMOTs</span></span></span></span></em></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b zar;"> در برگ&shy;های گیاه توتون نشان داد که </span></span></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b zar;">با حضور عناصر پایه، این پیشبر قادر به هدایت و بیان این ژن است. </span></span></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b zar;">با توجه به</span></span></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b zar;"> حضور جایگاه&shy; های تنظیمی پاسخ&shy; دهنده به تنش&shy;های </span></span></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b zar;">زیستی و </span></span></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b zar;">غیر زیستی</span></span></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b zar;"> در پیشبر ژن </span></span></strong><strong><em><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">ObEOMTs</span></span></span></span></em></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b zar;">،</span></span></strong> <strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b zar;">انتظار می&shy;رود این پیشبر علاوه بر بیان ژن </span></span></strong><strong><em><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">EOMTs</span></span></span></span></em></strong><strong><span style="color:black;"><span style="font-family:b zar;"> در حد پایه، قادر باشد در مواجهه با تنش&shy;های محیطی، میزان بیان ژن را تغییر دهد. </span></span></strong><br> &nbsp;</div> <em>Ocimum basilicum</em> L. (2n=48) is a medicinal plant that belongs to Lamiaceae family. Eugenol is one of the most important components of basil essential oil which is utilized as an anti-bacterial and anti-fungal material in various industries. Phenylpropanoids such as methyl eugenol possess anti-oxidant properties against free radicals and act as protective compounds in plant responses to the biotic and abiotic stresses. Methyl eugenol O-methyl transferase (EOMTs), as a key enzyme of phenylpropanoids biosynthesis pathway, converts eugenol into methyl eugenol by methylation. In this study, we isolated <em>EOMTs</em> gene promoter from the basil plant and cloned in pTG19-T vector for sequencing. Then, this sequence w::as char::acterized and analyzed by bioinformatics softwares. We aimed to investigate the possible gene expression regulation of <em>EOMTs</em> gene under different environmental conditions and recognition different regulatory motifs of its promoter. Analysis of <em>EOMT</em>s gene promoter (1209 bp) indicated that this sequence included some important regulatory elements which could respond to high temperature and drought stress such as MYB, MYC, HSE, and WRKY. Transient expression of the <em>GUS</em> gene under <em>ObEOMT</em>s promoter control in <em>Nicotiana tabacum</em> leaves showed that this promoter including core elements was able to direct the basal expression of this gene. It is expected that this promoter will be capable of changing the expression levels of <em>EOMTs</em> gene in reaction to different environmental stresses because there are stress-responsive regulatory sites in <em>ObEOMT</em>s gene promoter. پیشبر EOMTs, عناصر cis-acting, تنش خشکی, ریحان EOMTs promoter, cis-acting elements, drought stress, Ocimum basilicum L. 202 189 http://gebsj.ir/browse.php?a_code=A-10-299-1&slc_lang=fa&sid=1 Fatemeh Khakdan فاطمه خاکدان khakdan.biotech@gmail.com 10031947532846002609 10031947532846002609 No Department Cell and Molecular Biology, Faculty of Science, Farzanegan Semnan University, Semnan گروه زیست‌شناسی سلولی و ملکولی، دانشکده علوم، دانشگاه فرزانگان سمنان Mojtaba Ranjbar مجتبی رنجبر ranjbarf@ausmt.ac.ir 10031947532846002610 10031947532846002610 Yes Department of Microbial Biotechnology, Faculty of Biotechnology, Amol University of Special Modern Technologies, Amol گروه بیوتکنولوژی میکروبی، دانشکده زیست‌فناوری، دانشگاه تخصصی فناوری‌های نوین آمل Nader Chaparzadeh نادر چاپارزاده nchapar@azaruniv.ac.ir 10031947532846002611 10031947532846002611 No Department of Biology, Faculty of Science, Azarbaijan Shahid Madani University, Tabriz گروه زیست‌شناسی، دانشکده علوم، دانشگاه شهید مدنی آذربایجان Athar Sadat Javanmard اطهر السادات جوانمرد a.javanmard@yu.ac.ir 10031947532846002612 10031947532846002612 No Department of Biology, Faculty of Science, Yasouj University, Yasouj گروه زیست‌شناسی، دانشکده علوم، دانشگاه یاسوج Houshang Alizadeh هوشنگ علیزاده halizade@ut.ac.ir 10031947532846002613 10031947532846002613 No Department of Agronomy & Plant Breeding, College of Agriculture & Natural Resources, University of Tehran, Karaj گروه زراعت و اصلاح نباتات، پردیس کشاورزی و منابع طبیعی، دانشگاه تهران