fa افزایش هضم پذیری شیر در اثر پیش تیمار بتا لاکتوگلوبولین شیر با شکل نوترکیب سیستم تیوردوکسین/ گلوتاتیون گیاهی تخصصی متفرقه Divers پژوهشي Research <strong><span style="font-family:b zar;">بتالاکتوگلوبولین (</span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-family:tim,serif;">BLG</span></span></strong><strong><span style="font-family:b zar;">) &nbsp;یکی از بزرگترین آلرژن های شیر گاو است که باعث هضم کم شیر می شود. وجود دو پیوند دی&shy;سولفیدی هضم این پروتئین را کاهش داده است. به نظر می رسد استفاده از احیا&shy;کننده&shy;هایی که بتوانند باندهای دی سولفیدی موجود در این پروتئین را احیاء کنند، هضم پذیری این پروتئین را افزایش می دهند. بدین منظور در این مطالعه از سیستم گلوتاتیون/ تیوردوکسین گیاهی برای افزایش هضم پذیری</span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-family:tim,serif;">BLG </span></span></strong><strong><span style="font-family:b zar;">&nbsp;استفاده شد. تیوردوکسین&shy;ها (</span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-family:tim,serif;">Trxs</span></span></strong><strong><span style="font-family:b zar;">)، دی&shy;سولفیدردوکتازهای هستند که در تنظیم اکسیداسیون/ احیاء سلولی دخالت دارند که خود توسط گلوتاتیون (</span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-family:tim,serif;">GSH</span></span></strong><strong><span style="font-family:b zar;">) احیاء می شوند. </span></strong>&nbsp;<strong><span style="font-family:b zar;">در این مطالعه با در دست داشتن باکتری</span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-family:tim,serif;">&shy;</span></span></strong><strong><span style="font-family:b zar;"> تراریخته مقدار قابل توجهی از این پروتئین ها تولید و خالص سازی شد. برای احیاء </span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-family:tim,serif;">BLG</span></span></strong><strong><span style="font-family:b zar;"> از سیستم نوترکیب تیوردوکسین/ گلوتاتیون گیاه برنج به نام سیستم </span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-family:tim,serif;">GSH/OsTrx20</span></span></strong><strong><span style="font-family:b zar;"> استفاده شد. بدین منظور </span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-family:tim,serif;">BLG</span></span></strong><strong><span style="font-family:b zar;"> ابتدا با اجزای این سیستم</span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-family:tim,serif;">&shy;</span></span></strong><strong><span style="font-family:b zar;"> همراه با </span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-family:tim,serif;">GSH</span></span></strong><strong><span style="font-family:b zar;"> در دماهای مختلف 4، 25 و37 درجه سانتیگراد پیش تیمار شد. سپس </span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-family:tim,serif;">BLG</span></span></strong><strong><span style="font-family:b zar;"> با تریپسین مورد هضم آنزیمی قرار گرفت. میزان هضم پذیری </span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-family:tim,serif;">BLG</span></span></strong><strong><span style="font-family:b zar;"> با استفاده از ژل </span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-family:tim,serif;">SDS-PAGE</span></span></strong><strong><span style="font-family:b zar;"> و </span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-family:tim,serif;">RP-HPLC</span></span></strong><strong><span style="font-family:b zar;"> بررسی شد. نتایج نشان داد که پیش تیمار </span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-family:tim,serif;">BLG</span></span></strong><strong><span style="font-family:b zar;"> با استفاده از سیستم </span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-family:tim,serif;">GSH/OsTrx20</span></span></strong><strong><span style="font-family:b zar;"> به طور قابل توجهی بر هضم پذیری آن با آنزیم تریپسین مؤثر بوده است. </span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="color:red;"><span style="font-family:times new roman,serif;"></span></span></span></strong><br> <br> &nbsp; <p style="margin: 0in 0in 8pt; text-align: justify; line-height: 150%;">&Beta;-lactoglobulin (BLG) is one of the main allergens in cow&rsquo;s milk that causes it to be digested poorly. BLG structure has two intramolecular disulfide bonds and one free cysteine in cys121 that disulfide bonds are responsible for its low digestibility. It seems that the digestibility of BLG will be increased via the reduction of disulfide bonds. In the present work, the aim was to study the effect of plant glutathione/thioredoxin systems on the digestibility of milk BLG. Thioredoxins (Trxs) are small and abundant disulfide reductase in all organisms. they are reduced with Trx reductase or glutathione reductase or glutathione. Previously the genes encoding plant Trx, OsTrx20 was cloned and heterologously expressed in <em>E.coli</em>. In this work this protein was produced and purified in considerable amounts. The interaction of Trx with glutathione (GSH) was confirmed by insulin assay. The result of this assay showed that GSH was able to reduce OsTrx20. Therefore, in this work the effect of GSH/OsTrx20 on the digestibility of BLG was studied. Finally, BLG was pre-treated by GSH/OsTrx20 at 4, 25 and 37&deg;C and then digested with trypsin. The digestibility was studied by using SDS-PAGE and HPLC and allergenicity was studied by ELISA. The results revealed that the GSH/Trx system significantly affects on the BLG digestibility and allergenicity.<br> &nbsp;</p> گلوتاتیون, بتالاکتوگلوبولین, هضم‌پذیری, تریپسین, کروماتوگرافی مایع فاز معکوس glutathione, beta lactoglobulin, digestibility, allergenicity, reverse phase -liquid chromatography 111 120 http://gebsj.ir/browse.php?a_code=A-10-304-1&slc_lang=fa&sid=1 Tahere Shahriari farfani طاهره شهریاری فارفانی tahereshahriari2015@gmail.com 10031947532846003135 10031947532846003135 Yes Biotechnology Dept., Agriculture Faculty, Isfahan University of Technology, Iran گروه بیوتکنولوژی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه صنعتی اصفهان، ایران Azar Shahpiri آذر شاه پیری a.shahpiri@cc.iut.ac.ir 10031947532846003136 10031947532846003136 No Biotechnology Dept., Agriculture Faculty, Isfahan University of Technology, Iran گروه بیوتکنولوژی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه صنعتی اصفهان، ایران