fa بررسی عوامل موثر در انتقال ژن به سویا از طریق آگروباکتریوم مهندسی ژنتیک گیاهی Plant پژوهشي Research <div><strong><span style="font-family:B Zar;">تراریختی به واسطه آگروباکتریوم یکی از موثرترین روش&shy;ها برای تولید گیاهان تراریخته سویا به شمار می &shy;آید. کارایی تراریختی سویا </span></strong><strong><span style="font-family:B Zar;">با آگروباکتریوم به عوامل مختلفی بستگی دارد. </span></strong><strong><span style="font-family:B Zar;">این پژوهش با هدف بررسی امکان تولید اینترفرون گامای انسانی در گیاه سویا انجام گرفت. بدین منظور برخی عوامل موثر در تراریختی سویا از قبیل غلظت آگروباکتریوم (</span></strong><strong><span style="font-family:B Zar;">1 و 8/0 ،6/0 ،4/0 ،2/0=</span></strong><strong><span dir="LTR">OD_600nm</span></strong><strong><span style="font-family:B Zar;">)، مدت زمان تلقیح (</span></strong><strong><span style="font-family:B Zar;">10، 20، 40 و 60 دقیقه</span></strong><strong><span style="font-family:B Zar;">)، مدت زمان هم&shy;کشتی (</span></strong><strong><span style="font-family:B Zar;">1،</span></strong> <strong><span style="font-family:B Zar;">2، 3، 4 و 5 روز</span></strong><strong><span style="font-family:B Zar;">) و </span></strong><strong><span style="font-family:B Zar;">سطوح مختلف استوسیرینگون (0، 50، 100، 150، 200 و 250 میکرومولار) </span></strong><strong><span style="font-family:B Zar;">مورد بررسی قرار گرفتند. </span></strong><strong><span style="font-family:B Zar;">نتایج نشان داد، </span></strong><strong><span style="font-family:B Zar;">بیشترین میزان تراریختی در غلظت 8/0 =</span></strong><strong><span dir="LTR">OD_600nm</span></strong><strong><span style="font-family:B Zar;"> و کمترین میزان تراریختی در غلظت 2/0 =</span></strong><strong><span dir="LTR">OD_600nm</span></strong><strong><span style="font-family:B Zar;"> حاصل شده است. </span></strong><strong><span style="font-family:B Zar;">همچنین بیشترین میزان </span></strong><strong><span style="font-family:B Zar;">تراریختی</span></strong><strong><span style="font-family:B Zar;"> در مدت زمان تلقیح 40 دقیقه و مدت زمان هم&shy;کشتی 4 روز و کمترین میزان </span></strong><strong><span style="font-family:B Zar;">تراریختی</span></strong><strong><span style="font-family:B Zar;"> در مدت زمان تلقیح 10 دقیقه و مدت زمان هم&shy;کشتی 1 روز مشاهده شد. </span></strong><strong><span style="font-family:B Zar;">حضور استوسیرینگون </span></strong><strong><span style="font-family:B Zar;">اثر افزایشی </span></strong><strong><span style="font-family:B Zar;">در کارایی تراریختی سویا داشت، به طوری که </span></strong><strong><span style="font-family:B Zar;">بیشترین </span></strong><strong><span style="font-family:B Zar;">میزان تراریختی در غلظت&shy;های 150 تا 200 </span></strong><strong><span style="font-family:B Zar;">میکرومولار</span></strong><strong><span style="font-family:B Zar;"> استوسیرینگون حاصل شده است. در نهایت حضور ژن اینترفرون گامای انسانی در گیاهان تراریخته احتمالی به وسیله تکنیک </span></strong><strong><span dir="LTR">PCR</span></strong><strong><span style="font-family:B Zar;"> و آغازگرهای اختصاصی تایید شد. شرایط بهینه بدست آمده در این مطالعه می&shy;تواند برای انتقال ژن&shy;های هدف به این رقم سویا استفاده شود.</span></strong><strong><span dir="LTR"></span></strong><br> <span dir="LTR"></span></div> <div dir="ltr" style="text-align: justify;">&nbsp;</div> <em>Agrobacterium-mediated</em> transformation is one of the most effective methods for producing the transgenic soybean plants. The efficiency of soybean transformation with Agrobacterium depends on the various factors. The aim of this study was investigating the possibility of human interferon gamma production in soybean. For this purpose, some effective factors in soybean transformation such as Agrobacterium concentration (OD_600nm = 0.2, 0.4, 0.6, 0.8 and 1), inoculation time (10, 20, 40 and 60 minutes), co-cultivation time (1, 2, 3, 4 and 5 days) and different levels of acetosyringone (0, 50, 100, 150, 200 and 250 &mu;M) were evaluated. The results showed that the highest percentage of transformation was observed in the OD_600nm= 0.8 and the lowest percentage of transformation was obtained at the OD_600nm= 0.2. Also, the highest percentage of transformation was obtained in the 40 minutes of inoculation and 4 days of co-cultivation and the lowest percentage of transformation was observed in the 10 minutes of inoculation and 1 day of co-cultivation. The presence of acetosyringone had the increasing effect on the soybean transformation efficiency, and the highest percentage of transformation was obtained at the 150 until 200 &mu;M of acetosyringone. Finally, the presence of human interferon gamma gene in the probable transgenic plants was confirmed by the PCR technique and specific primers. The optimal conditions that obtained in this study can be used to transfer target genes to this soybean cultivar. استوسیرینگون, آگروباکتریوم, انتقال ژن, بهینه سازی, سویا Acetosyringone, Agrobacterium, Transformation, Optimization, Soybean 225 236 http://gebsj.ir/browse.php?a_code=A-10-396-1&slc_lang=fa&sid=1 Vahid Mehrizadeh وحید مهری زاده vahidmehrizade@yahoo.com 10031947532846003684 10031947532846003684 No Plant Breeding and biotechnology department, Faculty of Agriculture, University of Tabriz گروه به نژادی و بیوتکنولوژی گیاهی- دانشکده کشاورزی - دانشگاه تبریز Ebrahim Dorani ابراهیم دورانی uliaie@yahoo.com 10031947532846003685 10031947532846003685 Yes Plant Breeding and biotechnology department, Faculty of Agriculture, University of Tabriz, Iran گروه به نژادی و بیوتکنولوژی گیاهی- دانشکده کشاورزی - دانشگاه تبریز، ایران Abolgasem Mohammadi ابولقاسم محمدی sa_mohammadi@yahoo.com 10031947532846003686 10031947532846003686 No Plant Breeding and biotechnology department, Faculty of Agriculture, University of Tabriz گروه به نژادی و بیوتکنولوژی گیاهی- دانشکده کشاورزی - دانشگاه تبریز Behzad Ghareyazi بهزاد قره یاضی ghareyazie@yahoo.com 10031947532846003687 10031947532846003687 No Agricultural Biotechnology Research Institute of Iran, Agricultural Research Education and Extension Organization (AREO), Karaj, Iran پژوهشگاه بیوتکنولوژی ایران -کرج، سازمان تحقیقات، ترویج و آموزش کشاورزی