fa بهینه‌سازی بیان موقت ژن به واسطه آگروباکتریوم در بادام مهندسی ژنتیک جانوری Animal پژوهشي Research <p></p><p dir="RTL"></p><p dir="RTL"></p> <p dir="RTL"><strong>از آنجاکه انتقال دایم ژن و تولید گیاه تراریخته به‌ویژه در گیاهان چند</strong><strong><span dir="LTR">&shy;</span></strong><strong>ساله مانند بادام لازمه‌ی صرف وقت و هزینه است، بهینه‌سازی عوامل مختلف اثر گذار در تراریزش گیاهان، مورد توجه قرار می&shy;گیرد. بیان موقت ژن با استفاده از اگروباکتریوم (اگرواینفیلتریشن) یک راهکار مفید برای بررسی عملکرد ژن در سیستم‌های بیانی متفاوت است. از آنجاکه بهینه&shy; کردن فاکتورهای مؤثر در روش‌های تراریزش لازمه برنامه‌های انتقال ژن است، این پژوهش با هدف توسعه یک سیستم کارآمد برای بیان موقت به‌واسطه اگروباکتریوم در برگ‌های بادام، جهت پیش‌بینی سریع عملکرد سیستم‌های تظاهر و پروتئین نوترکیب در بادام انجام شد. ژن گزارشگر لیکیناز برای ارزیابی عواملی که سطح بیان موقت را تحت تأثیر قرار می&shy;دهند، به‌کار&shy;برده&shy; شد. مزیت اصلی استفاده از این ژن، سادگی کار، حساسیت بالا و ایمنی زیستی آن است. سه سیستم تظاهر مختلف حامل ژن لیکیناز، که تحت تأثیر عناصر تنظیمی متفاوت قرار داشتند به‌واسطه دو سویه اگروباکتریوم </strong><strong><span dir="LTR">LBA4404</span></strong><strong> و </strong><strong><span dir="LTR">GV3501</span></strong><strong> با استفاده از سرنگ بدون سوزن به برگ‌های رقم‌های مامایی و شاهرود 12 بادام انتقال داده&shy;شد. بعد از سه روز میزان پروتئین فعال اندازه‌گیری شد</strong><strong><span dir="LTR">.</span></strong><strong> آزمون‌های آماری نشان داد که بیشترین میزان تولید پروتئین در برگ‌های رقم مامایی با استفاده از سیستم تظاهری که موجب تجمع پروتئین در شبکه آندوپلاسمی می‌شود، با کاربرد سویه </strong><strong><span dir="LTR">LBA4404</span></strong><strong> به‌دست می&shy;آید. از این‌رو سیستم تظاهر مربوطه و سویه باکتری </strong><strong><span dir="LTR">LBA4404</span></strong><strong> و رقم مامایی بادام جهت دستیابی به بادام تراریخته پیشنهاد می‌شود.</strong></p> <table align="left" cellpadding="0" cellspacing="0" hspace="0" vspace="0"> <tbody> <tr> <td align="left"><p></p></td> </tr> </tbody> </table> <div style="clear:both;"></div> <p>since permanent transfer of genes and transgenic plant production, particularly in perennial plants such as almonds are time and cost consuming, optimization of various factors affecting the transgenic plants is critical. Transient genetic expression using <em>Agrobacterium</em> (Agroinfiltration) in plant is a useful tool to study gene function indifferent gene expression systems. Since optimization of factors that could affect the transgenic methods is necessary for gene transfer programs, Because This study was aimed at developing an efficient system for transient expression via Agrobacterium in almond leaves for rapid prediction of systems performance. Here the lichenasereporter gene was usedto assessthe parametersinfluencing thelevel oftransient expression. The main advantagesof using thisgene includeeasy operation, high sensitivity and biosafety. Three different constructs carrying lichenase gene and differentregulatoryelementswereinfiltrated intoleaves ofmamaei and shahrood 12cultivars,by two Agrobacteriumstrain, LBA4404 andGV3501,using syringewithoutneedle.After threedays,the amount of active proteinwas measured. Statistical analysis showedthat the highestamount ofprotein was obtainedin theleavesof mamaei cultivar transformedby theexpression systemcausing accumulation ofproteins in theendoplasmic reticulum by LBA4404 strain. So forrapidproduction ofrecombinant protein in Almond, theagroinfiltration method by using the related expression system, LBA4404 strain and mamaei cultivar, isrecommended.</p> اگرواینفیلتریشن اگروباکتریوم بادام بیان موقت سیستم تظاهر Transient expression, Agroinfiltration, Agrobacterium, Expression system, Almond. 9 18 http://gebsj.ir/browse.php?a_code=A-10-67-1&slc_lang=fa&sid=1 Neda Mirakhorli ندا میرآخورلی afsaneheydary@yahoo.com 10031947532846001587 10031947532846001587 Yes shahrekord university دانشگاه شهرکرد Afsane Heydari Reyhani افسانه حیدری ریحانی nedamirakhorli@yahoo.com 10031947532846001588 10031947532846001588 No shahrekord university دانشگاه شهرکرد Behrooz Shiran بهروز شیران be_shiran@yahoo.com 10031947532846001589 10031947532846001589 No shahrekord university دانشگاه شهرکرد Sadollah Hooshmand سعدالله هوشمند s_hoshmand@yahoo.com 10031947532846001590 10031947532846001590 No shahrekord university دانشگاه شهرکرد