fa تراریختی گوجه فرنگی با ژن پیروفسفاتاز واکوئلی (AVP1) در جهت افزایش تحمل آن به شوری مهندسی ژنتیک گیاهی Plant پژوهشي Research <div style="text-align: justify;"><span style="font-size:10pt"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span new="" romans="" style="font-family:" times=""><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" lotus="" style="font-family:">امروزه مهندسی ژنتیک به یکی از ابزار امیدوار کننده برای تولید گیاهان تراریخته مقاوم به تنش&shy;های زیستی از جمله تنش شوری تبدیل شده&shy; است. هدف از این تحقیق، انتقال ژن پیروفسفاتاز واکوئلی آرابیدوبسیس به گیاه گوجه فرنگی با استفاده از آگروباکتریوم بود. وکتور نوترکیب </span></span>pPZP<span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" lotus="" style="font-family:"> حامل ژن </span></span>AVP1<span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" lotus="" style="font-family:"> ابتدا به باکتری اکولای جهت تکثیر و&nbsp; سپس به باکتری آگروباکتریوم &nbsp;جهت تاریختی گیاه گوجه &shy;فرنگی انتقال یافت. ریزنمونه&shy; های کوتیلدون و هیپوکوتیل تلقیح یافته با آگروباکتریوم حاوی وکتور نوترکیب پس از هم&shy;کشتی&nbsp; با آگروباکتریوم جهت باززایی در محیط کشت تکمیل شده با&nbsp; سه غلظت مختلف </span></span>BAP<span style="font-size:12.0pt"><span b="" lotus="" style="font-family:"> کشت شدند . بین ریزنمونه و تنظیم کننده رشد گیاهی </span></span>BAP<span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" lotus="" style="font-family:"> اثر متقابل معنی&shy;داری در باززایی نوساقه&shy; های تراریخته مشاهده نشد، ولی اثر میزان </span></span>BAP<span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" lotus="" style="font-family:"> و نوع ریزنمونه در ترایختی گیاه معنی&shy;دار بود. مقایسه میانگین با&nbsp; آزمون دانکن در سطح احتمال 5درصد نشان داد که از محیط تکمیل شده با 2 میلی&shy;گرم در لیتر </span></span>BAP<span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" lotus="" style="font-family:"> گیاهان تراریخت بیشتری باززا شدند. همچنین درصد باززایی ریزنمونه&shy; های کوتیلدون نسبت به هیپوکوتیل بهتر بود.&nbsp; به منظور بررسی مولکولی گیاهچه های احتمالا تراریخت، استخراج </span></span>DNA<span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" lotus="" style="font-family:"> از نمونه &shy;ها انجام و سپس با استفاده از پرایمرهای اختصاصی ژن </span></span>AVP1<span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" lotus="" style="font-family:">، </span></span>PCR<span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" lotus="" style="font-family:"> صورت گرفت. نتایج حاصل وجود محصول واکنش با طول 440 جفت باز ژن </span></span>AVP1<span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" lotus="" style="font-family:"> را نشان داد. در مرحله بعد گیاهان تراریخت جهت تولید بذر به گلخانه منتقل شدند. </span></span></span></span></span></span></div> <div style="text-align: justify;"><span style="font-size:10pt"><span style="unicode-bidi:embed"><span new="" romans="" style="font-family:" times=""><span style="font-size:11.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">Genetic engineering becomes a hopeful tool to develop stress tolerance transgenic plants including salt tolerance transgenic plants. The subject of this study was the transformation of tomato with a vascular antiporter gene using Agrobacterium. The pBZP plasmid harboring AVP1 gene was transferred to <i>E.coli</i> for amplification and then transferred to Agrobacterium for tomato transformation. Cotyledon and hypocotyl explants inoculated with recombinant Agrobacterium transferred to MS medium supplemented with three concentrations of <st1:stockticker w:st="on">BAP</st1:stockticker> for plant regeneration. Analysis of variance showed there was no interaction between <st1:stockticker w:st="on">BAP</st1:stockticker> and explant type in regeneration capacity but both explant and BAP concentration in medium had significant effect on transformation efficiency. Mean compression using Duncan multiple rang test at 5 percent level showed that highest regeneration of transgenic plants achieved in MS medium supplemented with 2 mg/L <st1:stockticker w:st="on">BAP</st1:stockticker>. Regeneration efficiency from Cotyledon explant was more than cotyledonary explants. Genomic <st1:stockticker w:st="on">DNA</st1:stockticker> of putative transgenic plants extracted and analyzed by <st1:stockticker w:st="on">PCR</st1:stockticker> for presence of transgene using AVP1 gene specific primers. The results showed 440 bp of <st1:stockticker w:st="on">AVP</st1:stockticker>1 amplicon in transgenic plants. The transgenic plants transferred to greenhouse for next investigations.&nbsp;&nbsp; </span></span></span></span></span></div> تحمل به شوری, کوتیلدون, واکوئل, پمپ غشایی Salt tolerance, cotyledon, vacuole, membrane pomp 22 30 http://gebsj.ir/browse.php?a_code=A-10-214-2&slc_lang=fa&sid=1 Ebrahim Dorani ابراهیم دورانی uliaie@yahoo.com 10031947532846005701 10031947532846005701 Yes Department of Plant Biotechnology and plant Breeding, Faculty of Agriculture, University of Tabriz, Iran گروه به نژادی و بیوتکنولوژی گیاهی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه تبریز، ایزان Mahmoud Toorchi محمود تورچی ssanam_sharbaf@yahoo.com 10031947532846005702 10031947532846005702 No Department of Plant Biotechnology and plant Breeding, Faculty of Agriculture, University of Tabriz, Iran گروه به نژادی و بیوتکنولوژی گیاهی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه تبریز، ایزان