Genetic Engineering and Biosafety Journal

fa بهینه سازی کالوس زایی در گیاه دارویی Cistanche tubulosa Optimization of callus induction in medicinal plant Cistanche tubulosa مهندسی ژنتیک گیاهی Plant پژوهشي Research  گونه  Cistanche tubulosa، گیاه هالوپارازایت(Holoparasitic)  و چند ساله، از معروفترین گیاهان مرتعی و دارویی است که به عنوان "جینسنگ بیابانها" شناخته میشود.  برای این گیاه خواص درمانی زیادی بیان شده است. در این پژوهش کالوسزایی این گیاه بهینهسازی شد. در ابتدا به منظور تعیین بهترین تیمار ضدعفونی،  قطعات گیاهی در پنج تیمار هیپوکلریت سدیم با غلظتهای 1، 2، 3، 4 و 5 درصد  به مدت 10 دقیقه ضدعفونی شده و در محیط کشت MS دارای سه درصد ساکارز و 10 گرم در لیتر آگار کشت شدند. با مشاهده قهوه ای شدن ریزنمونهها، اثر تیمارهای زغال فعال و اسید اسکوربیک روی کنترل قهوه ای شدن ریزنمونه ها بررسی شد. در این پژوهش، جهت کالوسزایی از ریزنمونه های مختلف استفاده شد. برای بررسی تاثیر تنظیمکنندههای رشد گیاهی روی کالوسزایی گیاه، ریزنمونه ها روی محیط کشت  MS داری BAP با غلظت 5/0 میلیگرم بر لیتر ، کاینتین  با غلظت 5/0 میلیگرم بر لیتر و 2.4.D در بیست و سه سطح (0، 5/0، 1، 5/1، 2، 5/2، 3، 5/3، 4، 5/4، 5، 5/5، 6، 5/6، 7، 5/7، 8، 5/8، 9، 5/9، 10، 5/10 و11 میلیگرم بر لیتر) در سه تکرار کشت شدند. این آزمون در قالب طرح کامل تصادفی انجام شد. پس از 10 روز، تا 2 ماه احتمال ایجاد کالوس  بررسی شد. نتایج نشان داد که کمترین میزان آلودگی باکتریایی و قارچی در ریزنمونه ها، مربوط به تیمار دو درصد هیپوکلریت سدیم و زمان 10 دقیقه ضدعفونی مشاهده شد.. تیمار 5/0 گرم در لیتر زغال فعال به اضافه 5/0 گرم بر لیتر اسید اسکوربیک توانست به خوبی قهوهای شدن را کنترل کند. بیشترین درصد کالوسزایی در تیمار 5/0 میلیگرم در لیتر کاینتین  به همراه 5/0 میلیگرم بر لیتر BAP و 5/8 میلیگرم بر لیتر 2-4-D بدست آمد. نتایج این پژوهش میتواند در آینده جهت انجام باززایی غیر مستقیم و  همچنین تولید مواد موثره دارویی در محیط درون شیشهای با استفاده از کشت کالوس و کشت سوسپانسیون سلولی استفاده شود. Abstract <div style="text-align: justify;">Cistanche tubulosa, a holoparasitic perennial plant, is one of the most famous pasture and medicinal plants known as "desert ginseng". Many therapeutic properties have been reported for this plant. In this study, the callus formation of this plant was optimized. Initially, in order to determine the best disinfection treatment, plant parts were disinfected in five sodium hypochlorite treatments with concentrations of 1, 2, 3, 4 and 5% for 10 minutes and cultured in MS medium containing 3% sucrose and 10 g/L agar. By observing the browning of the explants, the effect of activated charcoal and ascorbic acid treatments on controlling the browning of the explants was investigated. In this study, different explants were used for callus formation. To investigate the effect of plant growth regulators on plant callus formation, explants were cultured on MS medium containing BAP at a concentration of 0.5 mg/L, kinetin at a concentration of 0.5 mg/L, and 2.4.D at twenty-three levels (0, 0.5, 1, 1.5, 2, 2.5, 3, 3.5, 4, 4.5, 5, 5.5, 6, 6.5, 7, 7.5, 8, 8.5, 9, 9.5, 10, 10.5, and 11 mg/L) in three replicates. This experiment was conducted in a completely randomized design. After 10 days, the probability of callus formation was examined for up to 2 months. The results showed that the lowest bacterial and fungal contamination in the explants was observed in the treatment of 2% sodium hypochlorite and 10 minutes of disinfection. The treatment of 0.5 g/L activated charcoal plus 0.5 g/L ascorbic acid was able to control browning well. The highest callus formation percentage was obtained in the treatment of 0.5 mg/L kinetin plus 0.5 mg/L BAP and 8.5 mg/L 2-4-D. The results of this study can be used in the future to perform indirect regeneration and also to produce active pharmaceutical ingredients in vitro using callus culture and cell suspension culture.</div>   Cistanche tubolosa , کالوس زایی, 2,4-D, قهوه ای شدن. Cistanche tubolosa, Callus induction, 2,4-D, Browning 213 224 http://gebsj.ir/browse.php?a_code=A-10-282-2&slc_lang=fa&sid=1 Fatemeh Akbari فاطمه اکبری fateme0824@gmail.com 10031947532846006062 10031947532846006062 No Shirvan Agriculture Faculty, University of Bojnord, Bojnord, Iran. دانشکده کشاورزی شیروان، دانشگاه بجنورد Fatemeh Zaker Tavallaie فاطمه ذاکر تولایی f.zaker.t@um.ac.ir 10031947532846006063 10031947532846006063 Yes Dept. of Plant Production and Genetics Engineering, Shirvan Agriculture Faculty, University of Bojnord, Bojnord, Iran. گروه مهندسی تولید و ژنتیک گیاهی، دانشکده کشاورزی شیروان، دانشگاه بجنورد. ایران Masoumeh Salehi معصومه صالحی salehimasomeh@gmail.com 10031947532846006064 10031947532846006064 No National Salinity Research Center, Agricultural Research, Education and Extension Organization (AREEO), Yazd, Iran مرکز ملی تحقیقات شوری، سازمان تحقیقات آموزش و ترویج کشاورزی، یزد