Genetic Engineering and Biosafety Journal

fa انتقال ژن اینترفرون آلفای انسانی (HU-IFN-α) به گوجه فرنگی رقم ارومیه با استفاده از آگروباکتریوم تومفاشینس Transformation of human IFN-α (HU-IFN-α) gene to Urmia cultivar of tomato using Agrobacterium tumefaciens مهندسی ژنتیک گیاهی Plant پژوهشي Research <div style="text-align: justify;">اینترفرونها به ویژه اینترفرون آلفای انسانی از جمله پروتئینهایی هستند که ارزش درمانی و اقتصادی بالای آنها باعث شده تا محققین به دنبال تولید اینترفرونها از منابع دائمی، ایمن و ارزان مثل گیاهان برآیند. این پژوهش با هدف بررسی امکان تولید اینترفرون آلفای انسانی در گیاه گوجه فرنگی انجام شد. بدین منظور برخی عوامل موثر در انتقال ژن اینترفرون آلفای انسانی (HU-IFN-α) به گوجه فرنگی از قبیل نوع ریزنمونه (کوتیلدون و هیپوکوتیل)، غلظت آگروباکتریوم (1 و 8/0 ،6/0 ،4/0 ،2/0=OD600nm)، مدت زمان تلقیح (5، 10، 15، 20 و 25 دقیقه)، مدت زمان همکشتی (1، 2، 3 و 4 روز) و غلظتهای مختلف آنتیبیوتیک هیگرومایسین (صفر، 5/7، 10، 15 و 20 میلیگرم در لیتر) مورد بررسی قرار گرفتند. نتایج حاصل نشان داد، ریزنمونه کوتیلدون به عنوان مناسبترین ریزنمونه و غلظت 15 میلیگرم در لیتر هیگرومایسین به عنوان غلظت مؤثر آنتیبیوتیک در تراریختی گوجه فرنگی معرفی شدند. همچنین بیشترین میزان تراریختی ریزنمونههای گوجه فرنگی در غلظت آگروباکتریوم 6/0 =OD600nm و مدت زمان تلقیح 20 دقیقه و مدت زمان همکشتی سه روز مشاهده شد. در نهایت آنالیز مولکولی گیاهان تراریخته احتمالی با استفاده از روش PCR و آغازگرهای اختصاصی، حضور ژن اینترفرون آلفای انسانی را در گیاهان تراریخته تایید کرد.</div> <div style="text-align: justify;">Interferons, especially human interferon Alpha, have high therapeutic and economic value and there is a strong interest in producing them from stable, safe and inexpensive sources such as plants. The aim of this study was investigated the possibility of transformation of tomato with human interferon Alpha2b. For this purpose, some of the effective factors on the transfer of the human IFN-α gene to tomato, such as the type of explant, Agrobacterium concentration (OD600nm = 0.2, 0.4, 0.6, 0.8 and 1), inoculation time (5, 10, 15, 20 and 25 minutes), co-cultivation time (1, 2, 3 and 4 days) and different concentration of the hygromycin (0, 7.5, 10, 15 and 20 mg/l) were investigated. The results showed that the cotyledon explants were the most suitable explant and 15 mg/L of hygromycin was the effective concentration of the antibiotic in transformation of tomato. Also, the highest percentage of transformation of tomato explants was observed in the OD600nm= 0.6 of Agrobacterium, 20 minutes of inoculation and 3 days of co-cultivation. Finally, the presence of human IFN-α gene in the probable transgenic plants was confirmed by the PCR technique and specific primers.</div>   آگروباکتریوم, انتقال ژن, اینترفرون آلفا, پروتئین نوترکیب, گوجه فرنگی Agrobacterium, Transformation, Interferon Alpha, Recombinant Protein, Tomato 89 101 http://gebsj.ir/browse.php?a_code=A-10-192-3&slc_lang=fa&sid=1 Vahid Mehrizadeh وحید مهری زاده vahidmehrizade@yahoo.com 10031947532846006054 0009-0009-9892-0916 No Department of Plant Breeding and Biotechnology, Faculty of Agriculture, University of Tabriz, Iran گروه به نژادی و بیوتکنولوژی گیاهی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه تبریز، ایران Ebrahim Dorani ابراهیم دورانی dorani@tabrizu.ac.ir 10031947532846006055 10031947532846006055 Yes Department of Plant Breeding and Biotechnology, Faculty of Agriculture, University of Tabriz, Iran گروه به نژادی و بیوتکنولوژی گیاهی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه تبریز، ایران