Genetic Engineering and Biosafety Journal

fa بررسی استفاده از ویروس جغجغه‌ای تنباکو (TRV) برای بیان پروتئین‌های نوترکیب در گیاه تنباکو Investigation of use of tobacco rattles virus (TRV) to express the recombinant proteins in the tobacco plant مهندسی ژنتیک گیاهی Plant پژوهشي Research برای بیان پروتئینهای نوترکیب درگیاه تنباکو انجام شد. ابتدا یک نسخه کوتاهتر از ناقل اصلی تولید شد. پس از افزودن پیشبر و توالی کد کننده پروتئین GFP به هر دو ناقل، آنها به دو سویه LBA4404 و GV3101 از اگروباکتریوم وارد شده و سپس به برگ گیاهان 4 یا 6  هفتهای تنباکو تلقیح شدند. در زمانهای مختلف پس از تلقیح، بیان پروتئین Gfp تحت تابش UV  در گیاهان تلقیح شده بررسی شد. پارامترهای نوع و اندازه ناقل، نوع باکتری و اثر زمان روی درصد سبزی برگ ناشی از بیان پروتئین Gfp بررسی شد. در گیاهان 6 هفتهای دارای ناقل GPSpTRV2 (کوتاه شده) با سویهی LBA4404 بیشترین میزان مساحت بخشهای سبز Gfp برگ مشاهده شد که این میزان 6/1 برابر مساحت بخش سبز در تیمار با ناقل GPpTRV2 (کوتاه نشده) در روز بیستم پس از تزریق بود. در گیاهان 4 هفتهای با  سویه LBA4404، حداکثر میزان مساحت بخشهای سبز در تیمارهای دارای ناقل GPSpTRV2، روز پانزدهم بدست آمد که 4/1 برابر مساحت بخشهای سبز در تیمارهای دارای ناقل GPpTRV2 در این روز بود. در گیاهان 6 هفتهای، میزان متوسط مساحت بخشهای سبز در گیاهانی که با هر دو سویه LBA4404 و GV3101 تزریق شده بودند تقریبا برابر بود. نتایج نشان داد که میزان بیان Gfp وابسته به زمان بوده و در روزهای پس از تلقیح دچار نوسان می شود. نتایج بدست امده از این پژوهش می‌تواند راه را برای استفاده از این ویروس به عنوان وکتور بیانی پروتئین‌های نوترکیب هموار سازد.   The object of this research was the investigation of efficiency of Tobacco rattle virus to express recombinant proteins in Nicotiana benthamiana. In the first step we produced a shorter version of the main vector. After addition of promotor and coding sequence for GFP protein to both vectors, they imported to two strains of Agrobacterium including LBA4404 and GV3101 and were inoculated leaves of 4 to 6 weeks' tobacco by them. At different times after inoculation, inoculated plants were photographed to determine the expression of GFP protein under UV irradiation. The parameters of the effect of type and size of vector, bacterial type and time effect on the percentage of leaf greens resulting from the expression of GFP protein were investigated. In 6-week-old plants that were injected with GPSpTRV2 (shortened) using LBA4404 strain was observed the maximum amount of green leaf area GFP, which is approximately 1.6 times the area of the green section was treated with the vector GPpTRV2 (not shortened) on the twentieth day after injection. In the 4-week-old plants fed with LBA4404 strain, the maximum amount of green areas in GPSpTRV2-containing plants was obtained on the 15th day, which is 1.4 times the maximum green area in GPpTRV2-containing plants in the same day. In 6-week-old plants, average area of green parts in the plants injected with both LBA4404 and GV3101 strains was approximately equal. Also, the level of plant leaf greens, which could indicate the expression of GFP, was time dependent and fluctuated in the days after inoculation.   بیان موقت, پروتئین نوترکیب, تنباکو, ژن گزارشگر, ویروس جغجغه‌ای تنباکو (TRV). Transiant expression, recombinant protein, Tobacco, Reporter gene, Tobacco Rattle virus (TRV). 0 0 http://gebsj.ir/browse.php?a_code=A-10-282-3&slc_lang=fa&sid=1 Faezeh Naghadeh فائزه نقاده naghadehf@gmail.com 10031947532846005967 10031947532846005967 No Dept. of Plant Production and Genetics Engineering, Shirvan Agriculture Faculty, University of Bojnord, Bojnord, Iran گروه مهندسی تولید و ژنتیک گیاهی، دانشکده کشاورزی شیروان، دانشگاه بجنورد Fatemeh Zaker Tavallaie فاطمه ذاکر تولایی f.zaker@ub.ac.ir 10031947532846005968 10031947532846005968 Yes Dept. of Plant Production and Genetics Engineering, Shirvan Agriculture Faculty, University of Bojnord, Bojnord, Iran. گروه مهندسی تولید و ژنتیک گیاهی، دانشکده کشاورزی شیروان، دانشگاه بجنورد Seyyed Ali Hosseini Tafreshi سید علی حسینی تفرشی sahosseini@kashanu.ac.ir 10031947532846005969 10031947532846005969 No Dept. of Biotechnology, collage of chemistry, University of Kashan. Kashan, Iran گروه بیوتکنولوژی، دانشکده شیمی، دانشگاه کاشان