OTHERS_CITABLE ارزیابی قند کل و قندهای محلول در سیب زمینی تراریخته مقاوم به بید سیب زمینی طبق قوانین سازمان­های نظارتی موجود در اغلب کشورهای دنیا، قبل از پذیرش و تجاری‌سازی محصولات تراریخته و فراورده ­های آن، باید ارزیابی­ های ایمنی دقیقی بر روی آن­ها با یک روش مقایسه­ای صورت گیرد. یکی از مراحل ارزیابی ایمنی گیاهان تراریخته، مقایسه لاین­های تراریخته با رقم زراعی غیرتراریخته از نظر محتوی متابولیتی و ترکیبات آنها است. این بررسی به منظور شناسائی تغییرات احتمالی ناخواسته و نامطلوب حاصل از دستورزی ژنتیکی (به عنوان مثال در نتیجه ورود ژن خارجی به درون ژنوم دیگر و یا تولید متابولیت جدید) صورت می گیرد. این فرایند به اصل ضرورتاً یکسان (این­همانی) معروف است. در این مطالعه تلاش شد میزان قند کل و همچنین قند‌های محلول مانند ساکارز، گلوکز و فروکتوز در سیب­زمینی­های تراریخت مقاوم به بید سیب­زمینی که در سال 1388 در پژوهشکده بیوتکنولوژی کشاورزی ایران تولید شده بودند مورد بررسی قرار گیرد. بدین منظور از 4 لاین تراریخته مقاوم به بید سیب­ زمینی که در آزمایش­های زیست‌سنجی مقاومت بالایی از خود نشان داده ­اند استفاده شد. این سیب­ زمینی­ها از تاریخ فوق در شرایط درون شیشه­ ای نگهداری شده­اند. نمونه­ های تراریخته به همراه گیاه شاهد به منظور تولید غده به گلخانه منتقل شده و از نمونه­ های نور دیده و نور ندیده غده ­ها و همچنین از نمونه­ های برگی این گیاهان جهت آنالیز متابولیت­ها استفاده شد. برای اطمینان از حضور تراژن در گیاهان و مواد گیاهی بررسی های مولکولی بر روی آنها انجام گرفت و نتایج حاصل از PCR نشان داد که ژن cry1Ab در همه نمونه­های تراریخته مورد ارزیابی حضور دارد. در بررسی میزان قند کل مشاهده شد که تفاوت معنی­داری بین گیاهان تراریخته با گیاه شاهد از لحاظ میزان قند کل موجود در بافت‌ها وجود ندارد و همچنین ارزیابی قندهای محلول نیز نشان داد که میزان قندهای ساکارز، گلوکز و فروکتوز بین گیاهان تراریخته با گیاه شاهد تفاوت معنی‌داری ندارد و در نتیجه با توجه به ترکیبات مورد بررسی و همچنین قوانین نظارتی کدکس ایمنی سیب‌زمینی‌های تراریخته از لحاظ این صفات مورد تائید بوده و مصرف آنها بدون خطر است. http://gebsj.ir/article-1-80-fa.pdf 2017-02-16 67 75 ژن cry1Ab سیب‌زمینی تراریخته قند کل قندهای محلول Evaluation of total carbohydrate and soluble sugars in transgenic potato resistant to potato tuber moth based on the regulatory frameworks in most countries, careful safety assessment based on comparison methods must be performed before the adoption and commercialization of GM crops and products. One of the safety assessments of GM plants is the comparison of key nutrients and metabolites between transgenic and non-transgenic lines. This study was designed to identify undesirable potential changes resulting from genetic manipulation (for example, as a result of the entry of foreign genes into the genome and new metabolite production) in transgenic potato resistant to potato tuber moth (Phetorima operculella). This process is known as substantial equivalence. This study attempted to examine total and soluble sugars such as sucrose, fructose and glucose in transgenic potato which were produced in Agricultural Biotechnology Research Institute of Iran. For this purpose, four transgenic lines (B2, B8, B11, B12) that have shown high levels of potato tuber moth resistance in bioassay tests were used. First, molecular analyses were performed on plant to be ensured of the presence of transgene, and the result of PCR showed that cry1Ab gene was present in all transgenic samples. The transgenic and control plants were transferred to greenhouse to produce the tubers. The harvested tubers were treated under light and dark conditions and then used for more analyses together with leaf samples. Evaluation of total sugar showed no significant differences between transgenic and control plants. Moreover, evaluation of soluble sugar showed that the contents of sucrose, fructose and glucose were not significantly different between transgenic and control plants. We conclude that according to evaluated components and regulatory rules of Codex, these transgenic potatoes are safe to use. http://gebsj.ir/article-1-80-en.pdf 2017-02-16 67 75 cry1Ab gene soluble sugar substantial equivalence total sugar transgenic potato Seyedhamid Mirrokni seyedhamid.mirrokni@yahoo.com 1 Agriculture and Natural Resources University of Tehran AUTHOR Hasan Rahnam hrahnama@abrii.ac.ir 2 Agricultural Biotechnology Research Institute of Iran, Karaj, Iran AUTHOR Hasan Zeynali 3 Agriculture and Natural Resources University of Tehran AUTHOR
OTHERS_CITABLE بررسی اثر سازگاری سویه در بیان موقت مبتنی بر روش اگروباکتریوم در ارقام خربزه (Cucumis melo L.) بیان موقت یک ژن اثرگذار در بیماری­زایی (effector) در گیاه میزبان با استفاده از اگرواینجکشن، یک روش قابل قبول برای بررسی نقش ژن در بیماری­زایی است. در این مطالعه تاثیر دو سویه اگروباکتریوم بر چهار رقم استاندارد و دو  رقم محلی خربزه در بررسی بیان موقت مورد ارزیابی قرار گرفت. سازگاری سویه­ های LBA4404  و GV3101  به وسیله تزریق سلولهای باکتری به برگ ارقام خربزه تعیین شد. زنده­مانی سلول­های اگروباکتریوم تزریق شده در بافت برگ به وسیله ارزیابی بیان پروکاریوتی ژن GUS 24 ساعت پس از تزریق تعیین شد. سویه LBA4404   پس از انتقال ناقل pCAMBIA3301  دارای ژن GUS اینترون­دار به عنوان کنترل مثبت برای تایید بیان موقت این ژن در سلول­های گیاه استفاده شد. انتقال ناقل­های pBI121  و pCAMBIA3301  به سویه LBA4404   با روش کلنی PCR با آغازگر­های PSh3-F/R تایید شد. راندمان بیان موقت در برگ­های ارقام خربزه، 48 ساعت پس از اگرواینجکشن سویه  LBA4404  حامل ناقل pCAMBIA3301   به وسیله سنجش هیستوشیمیایی ژن GUS  مشخص شد. برگ­های تزریق شده با سویه LBA4404  دارای ناقل pBI121   فعالیت ژن GUS را نشان دادند که تایید کننده زنده بودن سلول­های اگروباکتریوم در برگ ارقام خربزه بود. تمام ارقام ژن GUS را به صورت موقت با استفاده از اگرواینجکشن پس از گذشت 24 ساعت بیان کردند. این نتایج می تواند در مطالعات آینده به منظور بررسی عملکرد ژن­های اثرگذار منتخب در برهمکنش با ارقام استاندارد خربزه مورد استفاده قرار گیرد. http://gebsj.ir/article-1-75-fa.pdf 2017-02-16 76 86 ارقام استاندارد خربزه اگروباکتریوم بیان موقت سنجش GUS Evaluation of strain compatibility effects on Agrobacterium-mediated transient GUS expression in melon cultivars transient expression of a candidate effector gene in host plants following Agroinfiltration is a useful method to investigate the role of the gene in pathogenecity. In this study, the effects of two Agrobacterium tumefaciens strains on four standard melon lines and two Iranian melon cultivars were investigated to establish transient expression in melon. Compatibility of the LBA4404 and GV3101 strains was defined by injection of the bacterial suspensions into the leaves of cultivars. Viability of the injected Agrobacterium strain cells in leaf tissues was evaluated 24 hours after injection by prokaryotic GUS reporter gene assay. The LBA4404 strain harboring the pCAMBIA3301 vector containing an intron-GUS reporter gene was used to confirm eukaryotic GUS expression in the plant cells. The LBA4404 strain was transformed by the pBI121 and pCAMBIA3301 expression vectors and transient transformation was confirmed by colony PCR technique using the PSh3-F/R primers. The efficiency of transient transformation of the melon leaves was evaluated 48 hours after Agroinjection of the LBA4404 strain containing pCAMBIA3301 by the histochemical GUS assay. The leaves that were injected by LBA4404 harboring pBI121 showed GUS activity. All the melon cultivars transiently expressed the GUS reporter gene 24 hours after Agroinjection. These findings could be used in the future studies to evaluate function of candidate effector genes in interaction with standard melon lines. http://gebsj.ir/article-1-75-en.pdf 2017-02-16 76 86 Agroinjection GUS assay Melon Transient expression Sahba Toosi sahba.toosi@gmail.com 1 Ferdowsi University of Mashhad, Iran. AUTHOR Farhad Shokouhifar Shokouhifar@um.ac.ir 2 Ferdowsi University of Mashhad, Iran. AUTHOR Saeid Malekzadeh Shafaroudi malekzadeh-s@ um. ac .ir 3 Ferdowsi University of Mashhad, Iran. AUTHOR Abdolreza Bagheri abagheri@um.ac.ir 4 Ferdowsi University of Mashhad, Iran. AUTHOR
OTHERS_CITABLE مطالعه بیان عوامل رونویسی مرتبط با مقاومت به بیماری ساقه سیاه در آفتابگردان ساقه سیاه از جمله مهمترین بیماری­های قارچی آفتابگردان می باشد که عامل آن Phoma macdonaldii است. در این مطالعه، میزان تظاهر ژن­های عوامل رونویسی HD-Zip،AP2 domain ،MYB related ،WRKY family و MYB family در ژنوتیپ­های ENSAT-B5 (حساس به هر 3 جدایه قارچ عامل بیماری)، AS613 (مقاوم به MP8، MP10 و حساس به MA6) و ژنوتیپ جهش یافته M5-54-1 (مقاوم به MA6، MP10 و حساس به MP8) آفتابگردان بعد از آلودگی با جدایه­های MA6، MP8 و MP10 قارچ عامل بیماری و با روش RT-PCR کمی بررسی شد. در میان عوامل رونویسی مورد مطالعه، تظاهر سه عامل رونویسیAP2 domain ، WRKY family و MYB family تفاوت معنی­داری بین ترکیبات مختلف ژنوتیپ- جدایه نشان ­ندادند. تظاهر ژن­های مربوط به دو عامل HD-Zip و  MYB relatedدر تمام ترکیبات ژنوتیپ- جدایه به طور معنی داری سرکوب شد اما میزان آن بسته به ترکیب ژنوتیپ- جدایه متفاوت بود. نتایج نشان داد که افزایش در سرکوب ژن HD-ZIP و کاهش در سرکوب ژن MYB-Related در ایجاد مقاومت ژنوتیپ AS613 به جدایه­های MP8 و MP10 موثر است. در این تحقیق، ایجاد مقاومت در ژنوتیپ جهش یافته نسبت به جدایه های MA6 و MP10 با کاهش سرکوب ژن­های HD-Zip و MYB related در ارتباط است. http://gebsj.ir/article-1-77-fa.pdf 2017-02-16 87 95 آفتابگردان ساقه سیاه عوامل رونویسی تظاهر ژن Study on Expression of some Transcription Factors Associated with Resistance to Black Stem Disease in Sunflower black stem is one of the most important fungal diseases of sunflower caused by Phoma macdonaldii. In this study, expression level of some transcription factors (TF) including HD-Zip, AP2 domain, MYB- related, WRKY family and MYB family were studied using quantitative RT-PCR in sunflower genotypes, including ENSAT-B5 (susceptible to all 3 studied isolates; MA6, MP8, MP10), AS613 (resistant against MP8 and MP10 and susceptible to MA6), and M5-54-1 (a mutant genotype, resistant against MA6 and MP10 and susceptible to MP8) following infection by MA6, MP8 and MP10 isolates of P. macdonaldii. Among studied TFs, the expression level of two TFs, HD-Zip and MYB-related, were significantly different in genotype-isolate combinations but the expression level of three other TFs including AP2 domain, WRKY family and MYB family, were not significantly different in several genotype-isolate combinations. The expression of HD-Zip and MYB-related were suppressed in infected genotypes. Results revealed that increased repression of HD-Zip and decreased repression of MYB-related are affective in induction of resistance to MP8 and MP10 isolates in AS613 genotype. In this study, the induction of resistance in mutant genotype against MA6 and MP10 isolates was accompanied with decreased suppression of HD-Zip and MYB-related genes. http://gebsj.ir/article-1-77-en.pdf 2017-02-16 87 95 Sunflower black stem transcription factors gene expression Faramarz Hoshyardel f_hoshyardel@yahoo.com 1 university of urmiyeh AUTHOR Hamid Hatami Maleki hatamimaleki@yahoo.com 2 university of maragheh AUTHOR Reza Darvishzadeh darvish_r2001@yahoo.com 3 university of urmiyeh AUTHOR Morad Jafari m.jafari@urmia.ac.ir 4 university of maragheh AUTHOR
OTHERS_CITABLE انتقال و بیان ژن انسولین نوترکیب منومر در گیاه آرابیدوپسیس گسترش دیابت در جهان با افزایش قابل توجه­ای در دهه‌های آینده پیش بینی شده است. میزان شیوع این بیماری در کشور ایران نیز هر ساله در حال افزایش است و جان هزاران نفر بیمار را تهدید می‌کند. پروتئین دارویی آسپارت یکی از آنالوگ‌های دارویی اصلی برای درمان دیابت است که نسبت به انسولین لیسپرو زمان اوج سریع­تری دارد و می‌توان از آن در پمپ‌های انسولین، خودکار انسولین و در روش تزریق استفاده کرد. در این تحقیق ژن آسپارت بعنوان تراژن استفاده شد و همچنین برای تراریخت کردن گیاه آرابیدوپسیس تالیانا از دو نژاد اگروباکتریوم EHA101 و GV3101 که حاوی پلاسمید دوگانه pJawohl3 حامل ژن‌ انسولین مونومر آسپارت بود، استفاده شد. در این تحقیق گیاهان در مرحله گلدهی توسط اگروباکتریوم با روش غوطه­ورسازی گل آذین تیمار شدند. صحت حضور ژن انسولین مونومر آسپارت و بیان آن  با استفاده از تکنیک استخراج  DNA، واکنش زنجیره‌ای پلیمراز و وسترن بلات مورد تأیید قرار گرفت. نتایج حاصل از تراریخت شدن گیاه آرابیدوپسیس با پلاسمید pJawohl3 حاوی ژن انسولین آسپارت نشان داد که آگروباکتری سویه EHA 101 کارایی بالاتری در انتقال ژن دارد. http://gebsj.ir/article-1-97-fa.pdf 2017-02-16 105 96 آرابیدوپسیس تالیانا اگروباکتریوم انتقال ژن انسولین آسپارت Transformation and expression of recombinant insulin monomer in Arabidopsis plant the prevalence of diabetes is predicted to rise significantly in the coming decades. Also, the incidence of this disease is increasing in Iran every year. Aspart is an insulin analog. Aspart insulin has a more rapid peak than Lispro and can be used in insulin pumps, insulin pens and injection methods. In this research, Two Agrobacterium tumefaciens strains, EHA101 and GV 3101, containing pJawohl3 carrying the Aspart insulin gene were used to transform Arabidopsis thaliana Col-0 ecotype plants by floral dip infiltration method. Seeds of floral dip infiltrated plants were sown on the pots. Then, seedlings were treated by BASTA herbicide. Expression of the Aspart insulin gene was detected in transgenic plants by RT-PCR and western blot. Evaluation of the infiltrated plants revealed that the EHA101 strain of Agrobacterium was more efficient than GV3101 strain in gene transformation. http://gebsj.ir/article-1-97-en.pdf 2017-02-16 105 96 Agrobacterium Arabidopsis thaliana Aspart insulin Transformation Behnaz Hoseini hosseini.behnaz381@yahoo.com 1 AUTHOR GholamReza Sharifi sirchi sharifisirchi@yahoo.com 2 AUTHOR
OTHERS_CITABLE شناسایی، همسانه سازی وتعیین توالی ژن MT ND2 در مرغ‌های بومی خراسان میتوکندری مسئول تولید 90 درصد از انرژی مورد نیاز سلول می باشد. مقداری از تفاوت‌ها در عملکرد رشد جوجه‌های گوشتی و بیان فنوتیپی راندمان غذایی ممکن است مربوط به اختلاف در راندمان عملکرد میتوکندری باشد. این پژوهش بمنظور همسانه سازی و تحلیل مرغان بومی خراسان با تاکید بر ژن ND2  به منظور بررسی جهش­های احتمالی است. بدین منظور از نمونه خون مرغ بومی خراسان، DNA ژنومی استخراج گردید و با استفاده از آغازگرهای اختصاصی این ژن، واکنش زنجیره­ای پلیمراز جهت تکثیر ژن انجام شد، محصول واکنش بر روی ژل آگارز الکتروفورز شد. باندهای حاصل با استفاده از ناقل خطی pTZ57R/T در باکتری E. coli همسانه­ سازی و توالی­ یابی شد. مقایسه نوکلئوتیدی قطعه توالی­ یابی شده با ژنوم مرجع چهار جهش را نشان داد و شباهت 99% در 100% طول خود با توالی کامل ژنوم میتوکندری Gallus gallus در توالی­های ثبت شده میتوکندری طیور با شماره دسترسی X52392.1 (ژنوم مرجع)، GU261709.1، GU261712.1، AP006746.1، KF826490.1، HQ857210.1 و AY235571.1 نشان داد. مقایسه پروتئینی نشان دهنده شباهت توالی حاصل با توالی‌های پروتئینی مربوط به ژن ND2 میتوکندری طیور در بانک اطلاعاتی بود به گونه ای که بیشترین شباهت، 100% در 100% طول خود متعلق به ژن ND2 در Gallus gallus  با شماره دسترسی BAC57576.1 و کمترین شباهت متعلق به جنس ها و گونه های  Chrysolophus amherstiae با شماره دسترسی  AAF65702.1 و Tetrastes sewerzowi با شماره دسترسی ABH01111.1 با 80% شباهت در 100% طول خود بود. همچنین توالی اسیدآمینه‌ای مرغ بومی خراسان با توالی مرجع و سایر توالی‌ها با شماره مرجع YP272073.1، BAD11115.1، NP_006916.1، ADB06584.1 و ADW41566.1 شباهت 99% در 100% طول نشان داد. پس از تبدیل توالی نوکلئوتیدی بدست آمده به توالی اسیدآمینه‌ای، با توالی پروتئینی مرجع مقایسه شد. نتیجه این مقایسه تفاوت در یک اسیدآمینه را نشان داد. در اسیدآمینه 130 لوسین که اسیدآمینه ای غیرقطبی است به اسیدآمینه غیرقطبی متیونین تبدیل شد. جهش‌های مشاهده شده در این تحقیق از آنجایی که منجر به تغییر اسید آمینه شده است می‌توان به عنوان یک پایه در بررسی‌های اختلالات سوخت وساز و صفات تحت تاثیر ژن MT-DNA در مطالعات بعدی قرار گیرد http://gebsj.ir/article-1-65-fa.pdf 2017-02-16 113 106 همسانه سازی تعیین توالی MT ND2 مرغان بومی خراسان Indentifying, Cloning, and Determining the Sequence of MT-ND2 Gene in Khorasan’s Native Chickens discovering the sequences of mitochondrion has made it possible to study the presence of controlling genes in this organelle. Mitochondrion is responsible for producing 90 percent of the energy that the cell needs. Some differences in the broiler chicken growing function and the resulting phenotype and food efficiency may be related to differences in mitochondrion function. The aim of this study was to clone and to analyze the ND2 gene among Khorasan’s native chickens in order to investigate possible mutations. To this end, genomic DNA was extracted from blood sample taken from this population. Then, using ND2 specific primers, PCR was conducted in order to multiply this gene. The PCR product was cloned into pTZ57R/T linear vector and sequenced. Comparison between the sequenced fragments and the registered gene revealed four mutations. A similarity of 99% was observed between them and the complete mitochondrial genome sequence of Gallus gallus with the accession numbers of X52392.1 (reference), GU261709.1, GU262712.1, AP006746.1, KF826490.1, HQ857210.1, and AY23557.1. Comparison between proteins showed that the resulting sequence was similar to protein sequences related to mitochondrial ND2 gene of the poultry in the data bank. The maximum similarity (100% similarity) was with the ND2 gene in Gallus gallus with the accession number of BAC57576.1. The minimum similarity (88% similarity) was with the ND2 gene in Chrysolophus amherstiae with the accession number of AAF65702.1 and Tetra stessewerzowi with the accession number of ABH01111.1. Also, the amino acid sequences of Khorasan’s native chicken had 99% similarity with reference sequence and other sequences with the accession numbers of YP272073.1, BAD11115.1, NP_006916.1, ADB06584.1, and ADW41566.1. After translating the obtained nucleotide sequence to the amino acid sequence, it was compared with the reference proteins sequence. The result of this comparison showed a difference in one amino acid. The amino acid Leucine 130 was changed to Methionine. http://gebsj.ir/article-1-65-en.pdf 2017-02-16 113 106 Chickens- Mitochondrial Genes- Cloning- MT-ND2 Hamid Reza Izadnia izadnia1@gmail.com 1 Ferdowsi University of Mashhad , International Campus AUTHOR Mojtaba Tahmoorespur m_tahmoorespur@yahoo.com 2 Ferdowsi University of Mashhad AUTHOR Mohammad Reza Nassiry nassiryr@gmail.com 3 Ferdowsi University of Mashhad AUTHOR
OTHERS_CITABLE بررسی تنوع ژنتیکی ماهی شیربت (Barbus grypus) در رودخانه کرخه استان خوزستان و گونه پرورشی آن با استفاده از نشانگر ریزماهواره ماهی شیربت (Barbus grypus) از خانواده  Cyprinidaeمی­باشد که در منابع آبی غرب و جنوب­غرب ایران به­ ویژه آب­های استان خوزستان حضور گسترده­ای دارد. هدف از این پژوهش، بررسی تنوع ژنتیکی ماهی شیربت رودخانه کرخه با نمونه پرورشی آن با استفاده از 7 جایگاه ژنی ریزماهواره­ای می­باشد. در پاییز 1391 ،60 نمونه ماهی از دو منطقه جهت این بررسی، صید شد. طبق نتایج به­دست آمده متوسط میزان Fst­، 28/0 به دست آمد که نشان از تمایز ژنتیکی پایین بین جمعیت­های مورد بررسی می­باشد. دربررسی تعادل هاردی-واینبرگ، نمونه­ ها دراکثر لکوس­ها انحراف از تعادل را نشان دادند. همچنین میزان نسبتاً بالایی ازجریان ژنی بین جمعیتها مشخص گردید .تنوع ژنتیکی دو منطقه، شامل کرخه تعداد الل در جایگاه: 286/10Na= ، تعدادالل مؤثر: 789/6Ne=، هتروزیگوسیتی مشاهده شده: 691/0 Ho=، هتروزیگوسیتی موردانتظار: 840/0 He= و پرورشی 286/13Na= ، 141/9Ne=، 800/0 Ho=، 883/0 He= نیز تفاوت معنی­داری نداشتند. همچنین آنالیز واریانس با استفاده از داده­های ژنی نشان داد که تنوع پایینی بین جمعیت­ها وجود داشته و بخش اصلی تنوع مشاهده شده مربوط به درون جمعیت­ها می­باشد. نتایج بدست آمده در این پژوهش پیش از انجام آن، در گونه پرورشی با توجه به رعایت موارد اصلاح نژادی در مراکز تکثیر تقریباً قابل پیش بینی و مشخص بود. http://gebsj.ir/article-1-171-fa.pdf 2017-02-16 114 123 تعادل هاردی- واینبرگ تنوع ژنتیکی ریزماهواره ماهی شیربت Barbus grypus Genetic diversity of Barbus grypus in the Karkheh River in Khuzestan Province and cultured fish studied using a microsatellite marker Shirbot (barbus grypus) belongs to the Cyprinidae family and is widely present in the west and Southwest’s water resources of Iran, especially the Karkhe River in Khuzestan Province. The aim of this study was to compare levels of genetic polymorphism between Karkhe River and cultured Barbus grypus populations using seven microsatellite loci. Genetic diversity was investigated by studying 60 samples collected from two regions.  According to the results, the Fst value was 0.033, which indicates low genetic diversity between the populations. Most of the loci showed deviation from Hardy-Weinberg equilibrium. Also a relatively high level of gene flow was found among the population. Genetic variations in Karkheh: mean number of alleles per locus, Na=10.286, mean effective number of alleles, Ne=6.789, observed heterozygosity, Ho=0.691 and expected heterozygosity, He=0.840 and cultured fish Na=13.286, Ne=9.141, Ho=0.800 and He=0.883 were not statistically different. Also, analysis of molecular variance showed that there is low genetic variation among populations and most of the observed variation is within the populations. http://gebsj.ir/article-1-171-en.pdf 2017-02-16 114 123 Genetic Diversity Hardy-Weinberg Equilibrium Microsatellite Shirbot (Barbus grypus) Mahbobe Karami nasab 1 Gorgan University of Agricultural Sciences and Natural Resources, Gorgan, Golestan, Iran. AUTHOR Zeinab Hosseinnia 2 Gorgan University of Agricultural Sciences and Natural Resources, Gorgan, Golestan, Iran. AUTHOR Hamed Kolangi Miandare 3 Gorgan University of Agricultural Sciences and Natural Resources, Gorgan, Golestan, Iran. AUTHOR Ali Shabany 4 Gorgan University of Agricultural Sciences and Natural Resources, Gorgan, Golestan, Iran. AUTHOR