[صفحه اصلی ]   [Archive] [ English ]  
:: صفحه اصلي :: درباره نشريه :: آخرين شماره :: تمام شماره‌ها :: جستجو :: ثبت نام :: ارسال مقاله :: تماس با ما ::
:: دوره 7، شماره 2 - ( 10-1397 ) ::
جلد 7 شماره 2 صفحات 153-162 برگشت به فهرست نسخه ها
شناسایی گروه غالب ویروس اس سیب زمینی (PVS) در ایران و بیان ژن پوشش پروتئینی آن
ناهید مسعودی، احمد روحی بخش، محمدحسن عصاره، مسعود نادرپور، داود کولیوند
گروه گیاهپزشکی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه گیلان، رشت، ایران ، a_rouhibakhsh1966@yahoo.com
چکیده:   (436 مشاهده)
بیان ژن ویروس­ها در باکتری­ برای مطالعه پروتئین ویروس­ها و تولید آنتی­بادی­ اختصاصی مورد استفاده قرار می­گیرد. در این پژوهش، نمونه ­های سیب­زمینی از هشت استان ایران جمع ­آوری شده و ردیابی ویروس Potato virus S، به عنوان یکی از مخرب­ترین ویروس­های سیب­زمینی، بوسیله داس-الیزا و آرتی-پی­ سی­ آر انجام گرفت. تعیین گروه غالب با توجه به توالی ژن پوشش پروتئینی و پس از تجزیه فیلوژنی انجام شد. ژن کامل CP تکثیر و همسانه ­سازی شده و مورد توالی­ یابی قرار گرفت، سپس از پلاسمید pJET1.2/blunt برش داده شده و به پلاسمید بیان pET-28a (+) متصل شد و سازه (pET-28a:PVS:CP) به باکتری Escherichia coli سویه BL21 منتقل شد. بهینه ­سازی بیان ژن با القا بوسیله IPTG در غلظت­های 5/0، 1 و 2 mM به مدت 3، 4 و 6 ساعت انجام گرفت و توسط SDS-PAGE و وسترن بلات تایید شد. بر اساس توالی نوکلئوتیدی، جدایه­های ایرانی PVS به سه گروه تقسیم شدند که یک گروه با 22 عضو به عنوان گروه غالب شناخته شد. بیان پروتئین نوترکیب با وزن 34 کیلودالتون توسط وسترن تایید شد. القاء با غلظت 1 میلی­ مولار IPTG و به مدت 4 ساعت بهترین بیان را نشان داد. این نخستین گزارش بیان ژن پوشش پروتئینی ویروس PVS است که برای تهیه آنتی­ بادی این ویروس اهمیت دارد.
واژه‌های کلیدی: ویروس اس سیب‌زمینی، بیان ژن، پروتئین نوترکیب، تجزیه فیلوژنتیکی، PVS
متن کامل [PDF 728 kb]   (151 دریافت)    
نوع مطالعه: پژوهشي | موضوع مقاله: مهندسی ژنتیک میکروارگانیسم ها و ویروسها
دریافت: ۱۳۹۷/۹/۲۴ | پذیرش: ۱۳۹۷/۱۱/۱۷ | انتشار: ۱۳۹۷/۱۲/۶
ارسال نظر درباره این مقاله
نام کاربری یا پست الکترونیک شما:

CAPTCHA


XML   English Abstract   Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

Masoudi N, Rouhibakhsh A, Asareh M H, Naderpour M, Koolivand D. Identification of dominant isolate of Potato virus S in Iran and heterologous expression of its coat protein . Genetic Engineering and Biosafety Journal. 2018; 7 (2) :153-162
URL: http://gebsj.ir/article-1-269-fa.html

مسعودی ناهید، روحی بخش احمد، عصاره محمدحسن، نادرپور مسعود، کولیوند داود. شناسایی گروه غالب ویروس اس سیب زمینی (PVS) در ایران و بیان ژن پوشش پروتئینی آن. مهندسی ژنتیک و ایمنی زیستی. 1397; 7 (2) :153-162

URL: http://gebsj.ir/article-1-269-fa.html



دوره 7، شماره 2 - ( 10-1397 ) برگشت به فهرست نسخه ها
دوفصل نامه علمی-پژوهشی مهندسی ژنتیک و ایمنی زیستی Genetic Engineering and Biosafety Journal
Persian site map - English site map - Created in 0.07 seconds with 31 queries by YEKTAWEB 4006