دانشگاه شهید مدنی آذربایجان ، pazhouhandeh@gmail.com
چکیده: (5642 مشاهده)
در بین تنشهای مختلف، تنش شوری تهدید بزرگی برای گیاه محسوب میشود و مطالعه مکانیسم تحمل شوری در گیاه حائز اهمیت است. در یکی از مسیرهای تحمل شوری در گیاه مدل آرابیدوپسیس، پروتئین Salt Overly Sensitive3 (SOS3) که یک حسگر یونهای کلسیم و آغازگر مسیر تحمل شوری است با تشکیل کمپلکس SOS3-SOS2 موجب فعال سازی فرایندهای مختلف به منظور تحمل شوری میشود. از سوی دیگر، رادیکالهای سوپراکسید که در تنشهای مختلف ازجمله تنش شوری تولید میشود برای سلول مضر بوده و بایستی از بین بروند. چگونگی حذف این رادیکالهای سوپراکسید و حفظ سلول از آسیبهای اکسیداتیو در گیاهان مقاوم به شوری مشخص نیست. در این تحقیق، با کارگیری روش Yeast Two Hybrid System (Y2HS) و دوبل تراریزش مخمر Saccharomyces cerevisiaeسویه AH109 با ناقلهای pGBT9-SOS3 و pGADT10-AtcDNA میانکنشهای پروتئینی SOS3 در میان کتابخانه cDNA آرابیدوپسیس جستجو گردید. از چهار کلنی بدست آمده در روی محیط کشت انتخابی SD-AHWL استخراج DNA انجام و پس از تکثیر ناقل pGADT10-AtcDNA آنها در E. coli توالییابی صورت گرفت و در بانک اطلاعات آرابیدوپسیس BLAST شد. یکی از مهمترین میانکنشهای یافت شده مربوط به پروتئین Manganese Superoxide Dismutase 1 (MSD1) بود. MSD1 واکنش خنثی سازی رادیکالهای سوپراکسید برای حفاظت گیاه از آسیبهای اکسیداتیو ناشی از استرسها را به عهده دارد. میانکنش و بکارگیری MSD1 توسط SOS3 در مسیر مقاومت به شوری موجب نجات گیاه از آسیبهای اکسیداتیو میشود. در ادامه، میانکنش SOS3-MSD1 با جداسازی و همسانه سازی cDNA کامل MSD1 در ناقلهای دوبل هیبرید مخمر تایید شد. همچنین به کمک تکنیک GST-Pull Down نشان داده شد که پروتئین SOS3 تولید شده در باکتری از روی pGEX2TK-SOS3 و پروتئین نشاندار MSD1تولید شده از روی pGBKT7-MSD1 بصورت مستقیم باهم میانکنش دارند. این اولین گزارش از برهمکنش مسیر تحمل به شوری (SOS3) با مسیر حذف یونهای مضر سوپراکسید (MSD1) میباشد که مکانیسم مولکولی این دو مسیر را بهم مرتبط میسازد.
Khajehdehi M, Pazhouhandeh M, Mahmoudi F. The involvement of MSD1 metalloprotein in the mechanism of resistance to salinity by interaction with SOS3. gebsj 2015; 4 (2) :79-89 URL: http://gebsj.ir/article-1-69-fa.html
خواجه دهی مینا، پژوهنده مقصود، محمودی کردی فاطمه. دخالت متالوپروتئین MSD1 در مکانیسم مقاومت به شوری بوسیله میانکنش با SOS3. مهندسی ژنتیک و ایمنی زیستی. 1394; 4 (2) :79-89