[صفحه اصلی ]   [Archive] [ English ]  
:: صفحه اصلي :: درباره نشريه :: آخرين شماره :: تمام شماره‌ها :: جستجو :: ثبت نام :: ارسال مقاله :: تماس با ما ::
:: دوره 9، شماره 1 - ( 5-1399 ) ::
جلد 9 شماره 1 صفحات 11-18 برگشت به فهرست نسخه ها
ایجاد سیستم شناسایی وجود کوفاکتور مولیبدئوم در باکتری Escherichia coli
کیانا کبیر، خلیل زینلی نژاد*، آندریاس وبر، سیده ساناز رمضانپور، ماریون آیسنهوت
گروه اصلاح نباتات و بیوتکنولوژی، دانشکده تولید گیاهی، دانشگاه علوم کشاورزی و منابع طبیعی گرگان، ایران ، Khalil1381@yahoo.com
چکیده:   (1348 مشاهده)
یکی از آنزیم­های درگیر در تطبیق پذیری با شرایط مختلف محیطی، آنزیم بیوتین سولفوکساید ریداکتاز (BisC) است که علاوه بر توانایی تبدیل بیوتین سولفوکساید به بیوتین در شرایط اکسیداتیو، می­تواند متیونین سولفوکساید را نیز به متیونین تبدیل کند. اسید آمینه متیونین چه بصورت آزاد و چه در زنجیره پروتئینی اهمیت بسیاری در فرایند سنتز پروتئین و فعالیت آن داراست. آنزیم بیوتین سولفوکساید ریداکتاز (BisC) برای فعال بودن وابسته به کوفاکتور باکتریایی MGDـBis می­باشد. در این مطالعه به منظور تایید فعال بودن کوفاکتور باکتریایی MGDـBis روشی غیرمستقیم طراحی شد که در این روش از آنزیم باکتریایی بیوتین سولفوکساید (BisC) به عنوان ژن گزارشگر استفاده شد. در این راستا سازه ژنی BisCـpJet ‏ساخته شد و شوک حرارتی به باکتری E.coli استرین Mach1 منتقل شد. کلون­های تشکیل شده در محیط LB جامد با آنتی بیوتیک آمپیسیلین  200 µg/ml انتخاب شدند و سپس واکنش PCR روی آنها صورت گرفت. پس از تایید نتایج توالی یابی کلون­های مثبت، قطعه مورد نظر جدا و به ناقل بیانی pETDuet انتقال داده ­شد. کلونهای حاوی ژن به باکتری میزبان Rossetta منتقل شدند.  فرابیان آنزیم BisC بر روی ژل PAGEـSDS مورد بررسی قرار گرفت و نیز فعالیت این آنزیم بصورت باند بیرنگ بر اثر اکسید شدن متیل وایولوژن روی ژل  Native مشاهده شد که نشان دهنده حضور فعال کوفاکتور MGDـBis بود.
واژه‌های کلیدی: اشریشیا کلای، بیان بیش از حد، بیس ـ ام جی دی، بیوتین سولفوکساید، مولیبدئوم
متن کامل [PDF 733 kb]   (387 دریافت)    
نوع مطالعه: پژوهشي | موضوع مقاله: مهندسی ژنتیک گیاهی
دریافت: 1399/1/28 | پذیرش: 1399/6/26 | انتشار: 1399/6/26
ارسال نظر درباره این مقاله
نام کاربری یا پست الکترونیک شما:

CAPTCHA


XML   English Abstract   Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

Kabir K, Zaynali Nezhad K, Weber A, Ramezanpour S S, Eisenhut M. Establishment of molybdeum cofactor detection system in Escherichia coli. Genetic Engineering and Biosafety Journal. 2020; 9 (1) :11-18
URL: http://gebsj.ir/article-1-342-fa.html

کبیر کیانا، زینلی نژاد خلیل، وبر آندریاس، رمضانپور سیده ساناز، آیسنهوت ماریون. ایجاد سیستم شناسایی وجود کوفاکتور مولیبدئوم در باکتری Escherichia coli. مهندسی ژنتیک و ایمنی زیستی. 1399; 9 (1) :11-18

URL: http://gebsj.ir/article-1-342-fa.html



بازنشر اطلاعات
Creative Commons License این مقاله تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است.
دوره 9، شماره 1 - ( 5-1399 ) برگشت به فهرست نسخه ها
دوفصل نامه علمی-پژوهشی مهندسی ژنتیک و ایمنی زیستی Genetic Engineering and Biosafety Journal
Persian site map - English site map - Created in 0.04 seconds with 30 queries by YEKTAWEB 4341