گروه بیوتکنولوژی کشاورزی، دانشکده کشاورزی دانشگاه صنعتی اصفهان ، sayedt@cc.iut.ac.ir
چکیده: (8756 مشاهده)
یکی از شایعترین آلودگیهای ویروسی انسانی در سراسر جهان آلودگی ویروس هپاتیت Bاست. مؤثرترین شیوه برای کنترل و درمان این بیماری، تزریق واکسن میباشد، اما با توجه به گران بودن داروهای شیمیایی، تولید پروتئین نوترکیب ویروس هپاتیت B به عنوان واکسن خوراکی در گیاهان طی چند سال گذشته با بیورآکتورهای مناسب برای تولید ارزان و فراوان اهمیت یافته است. بنابراین در این پژوهش سعی شده است که ژن HBsAg با کمترین هزینه به گیاه مدل توتون منتقل شود. بدینمنظور ابتدا ناقل دوگانهpCAMBIA 1304 حاوی ژن HBsAg در باکتری Escherichia coli سویهJM107 و اگروباکتریوم سویه LBA4404 کلون و به روش قطعات برگی به گیاه توتون منتقل شد. باززایی ریزنمونههای تلقیح شده در محیطکشت انتخابی MS حاوی 500 میلیگرم در لیتر سفوتاکسیم و 15 میلیگرم در لیتر هیگرومایسین و همچنین تنظیمکنندههای رشد در غلظتهای یک میلیگرم در لیتر BAPو یک دهم میلیگرم در لیتر NAA انجام گرفت. در آخر پس از رسیدن گیاهچههای غربال شده به ارتفاع 15 سانتیمتر، به روش CTAB از گیاهان تراریخته احتمالی DNA استخراج شد و جهت شناسایی و تأیید حضور ژن با آغازگرهای اختصاصی واکنش PCR و جهت بررسی بیان ژن واکنش RT-PCR انجام گرفت و بدین ترتیب حضور و بیان این ژن در گیاهان تراریخته توتون تأیید شد
Neisi M, Sayed Tabatabae B E, Ghobadi C, Rajabi Memari H, Khaksar G. Transformation of Hepatitis B Virus surface antigen (HBsAg) gene into Tobacco plants. gebsj 2016; 5 (1) :23-30 URL: http://gebsj.ir/article-1-105-fa.html
