انتقال ژن آنتی ژن سطحی ویروس هپاتیت Bبه گیاه توتون
|
ماجده نیسی، بدرالدین ابراهیم سید طباطبایی*، سیروس قبادی، حمید رجبی معماری، غزاله خاکسار |
گروه بیوتکنولوژی کشاورزی، دانشکده کشاورزی دانشگاه صنعتی اصفهان ، sayedt@cc.iut.ac.ir |
|
چکیده: (6835 مشاهده) |
یکی از شایعترین آلودگیهای ویروسی انسانی در سراسر جهان آلودگی ویروس هپاتیت Bاست. مؤثرترین شیوه برای کنترل و درمان این بیماری، تزریق واکسن میباشد، اما با توجه به گران بودن داروهای شیمیایی، تولید پروتئین نوترکیب ویروس هپاتیت B به عنوان واکسن خوراکی در گیاهان طی چند سال گذشته با بیورآکتورهای مناسب برای تولید ارزان و فراوان اهمیت یافته است. بنابراین در این پژوهش سعی شده است که ژن HBsAg با کمترین هزینه به گیاه مدل توتون منتقل شود. بدینمنظور ابتدا ناقل دوگانهpCAMBIA 1304 حاوی ژن HBsAg در باکتری Escherichia coli سویهJM107 و اگروباکتریوم سویه LBA4404 کلون و به روش قطعات برگی به گیاه توتون منتقل شد. باززایی ریزنمونههای تلقیح شده در محیطکشت انتخابی MS حاوی 500 میلیگرم در لیتر سفوتاکسیم و 15 میلیگرم در لیتر هیگرومایسین و همچنین تنظیمکنندههای رشد در غلظتهای یک میلیگرم در لیتر BAP و یک دهم میلیگرم در لیتر NAA انجام گرفت. در آخر پس از رسیدن گیاهچههای غربال شده به ارتفاع 15 سانتیمتر، به روش CTAB از گیاهان تراریخته احتمالی DNA استخراج شد و جهت شناسایی و تأیید حضور ژن با آغازگرهای اختصاصی واکنش PCR و جهت بررسی بیان ژن واکنش RT-PCR انجام گرفت و بدین ترتیب حضور و بیان این ژن در گیاهان تراریخته توتون تأیید شد |
|
واژههای کلیدی: اگروباکتریوم، ترانفورماسیون، توتون تراریخت، ژن HBsAg، واکسن خوراکی |
|
متن کامل [PDF 267 kb]
(2668 دریافت)
|
نوع مطالعه: پژوهشي |
موضوع مقاله:
مهندسی ژنتیک گیاهی دریافت: 1394/6/10 | پذیرش: 1395/8/24 | انتشار: 1395/9/17
|
|
|
|
|
ارسال نظر درباره این مقاله |
|
|